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谷氨酸发酵工艺流程 分离提纯 发酵产物不同，分离提纯的方法会有所不同，产物分离、提纯的一般方法是： 代谢产物：蒸馏、萃取、离子交换等方法。 菌体本身：过滤、沉淀。 从自然界分离的菌种 产 品 基因工程 诱变育种 诱变育种 生产用菌种 扩大培养 原 料 微生物菌体 代谢产物 分离　提纯 发酵罐 发酵条件控制 接种 培养基配置 灭菌 Thank you! 微生物发酵生产氨基酸 微生物概述 发酵工程 微生物发酵生产氨基酸 微生物 微生物——一切肉眼看不见或看不清的微小生物。它们个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚。包括细菌、病毒、霉菌、酵母菌等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）根据存在的不同环境分为原核微生物、空间微生物、真菌微生物、酵母微生物、海洋微生物等。 微生物 微生物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 (细菌、放线菌、蓝藻) (酵母菌霉菌大型真菌) (草履虫变形虫衣藻) (噬菌体、艾滋病毒) 微生物种类及其代表 病毒 细菌 放线菌 发酵及发酵工程 发酵——利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。 发酵工程——采用现代化工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。 发酵工业的发展 原始发展阶段 发酵技术原始，技术进步缓慢，完全是经验式的，并不知道其中的原理。 传统发酵工业阶段 人们才开始了解发酵现象的本质 ，采用开放式的发酵方式，生产过程较为简单，对生产设备要求不高，规模一般不大。 现代发酵工业阶段 生产技术要求高；生产规模大；技术发展速度快；菌种的生产能力大幅度提高，新产品、新技术、新设备的应用达到前所未有的程度。 生物技术产业阶段 利用构建的基因工程菌生产。 发酵工程 发酵工程 发酵工程 为什么要利用微生物来发酵？ 繁殖非常迅速 培养易于控制 本身也容易改造 氨基酸 氨基酸——有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸均为α-氨基酸。 氨基酸制备的发展 氨基酸的制造是从1820年水解蛋白质开始。 1866年德国的立好生博士利用硫酸水解小麦面筋，分离出一种酸性氨基酸，依据原料的取材，便将此氨基酸命名为谷氨酸。 随后，日本有一教授在探讨海带汁液的鲜味时，提取了谷氨酸，并在1908年开始制造商品味之素——味精。1910年日本味之素公司用水解法生产谷氨酸，及食盐配合出售。但是这种方法生产谷氨酸耗粮太多，成本太高。 二次世界大战后不久，美国有人提出用发酵法生产谷氨酸的报告。 日本也相继开始了研究，1956年日本协和发酵公司分离出一种新的细菌，它可以利用100克葡萄糖转化为40克以上的谷氨酸。1957 年发酵法味精正式商业性生产，这标志着氨基酸发酵工业的诞生。 氨基酸制备的发展 中国于1958年开始研究L-谷氨酸，随后报道了酮戊二酸短杆菌2990-6的L-谷氨酸发酵及其代谢的研究结果。1965年把北京棒状杆菌ASI299和钝齿棒状杆菌ASI542先后应用于L-谷氨酸发酵工业生产，接着在选育其他氨基酸的优良菌株方面也取得一定成果，逐渐形成了中国的氨基酸发酵工业。 目前近20种氨基酸均可用微生物发酵法生产。但是，微生物的细胞具有代谢自动调节系统，使氨基酸不能过量积累。如果要在培养基中大量积累氨基酸，就必须解除或突破微生物的代谢调节机制。氨基酸发酵就是人为控制这种机制所取得的重大成果。 微生物发酵生产氨基酸 下表列出部分氨基酸生产所用的菌株 氨基酸 使用的菌株 谷氨酸 谷氨酸棒杆菌、乳糖发酵短杆菌 缬氨酸 北京棒杆菌、乳糖发酵短杆菌 丙氨酸 凝结芽孢杆菌 脯氨酸 链形寇氏杆菌?、黄色短杆菌 赖氨酸 黄色短杆菌?、乳糖发醇短杆菌 苏氨酸 大肠杆菌 酪氨酸 氨酸棒杆菌 发酵工程生产实例 谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径 葡萄糖 中间产物 a－酮戊二酸 谷 氨 酸 谷氨酸脱氢酶 NH4＋ 抑 制 谷氨酸发酵工艺流程 生产原料 淀粉质原料：玉米、小麦、甘薯、大米等。其中甘薯和淀粉最为常用； 糖蜜原料：甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜；因含丰富的生物素，不宜直接用来作为谷氨酸发酵的碳源。预处理方法：活性炭或树脂吸附法和亚硝酸法吸附。 氮源料：尿素或氨水。 谷氨酸发酵工艺流程 发酵过程参数测定 还原糖的测定 谷氨酸的测定 菌体形态观察 菌体浓度测定 发酵过程参数的控制 DO值 pH 温度 搅拌速度 发 酵 发