现代微生物发酵及技术教程.ppt

* 停滞期 A 现象：刚接种后一段时间，细胞数目和菌量不变，曲线平行于横轴。 。 B.原因：由于细胞进入新环境,细胞数目无增长，甚至有所下降有一个适应过程，进行大量的酶的生成。 C.细胞特点:细胞的新陈代谢非常旺盛，个体体积显著增大，但不分裂繁殖，为细胞分裂作准备。 * D.此期长短：及菌种遗传特性、菌龄、接种量、培养条件有关。 E.意义：在发酵工作中，缩短迟缓期的措施： 1）加大接种量（群体优势--适应性增强）； 2）用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛）； 3）调整培养基的成分，使种子基含有发酵培养基的成分； 4）选用繁殖快的菌种。 * 加速期 在延滞期后对数期前，细胞生长速率逐渐加快，进入短的加速期。此菌已完全适应周围的环境，由于有充足的营养，而且没有抑制生长的有害物质，菌体开始大量繁殖，很快进入对数期。 * 对数期 1. 现象：又称指数期，生长迅速，细胞数目以几何级数增加，其对数及时间呈直线关系。 2.细胞特点：此时细胞的大小、形态、染色性、生理特征等均趋于一致，代谢活跃，对外界环境因素的作用敏感。生长速率高，代时稳定。研究细菌的性状时应选用该期的细菌。 * 减速期 随着营养成分的减少、有害代谢产物的积累，生长速度明显放慢。虽然细胞总数仍在增加，但是细胞的比生长速率开始下降，细胞在代谢及形态方面逐渐衰退，经短时间的减速后进入静止期。 * 静止期 A.现象：活菌数目不增不减，生长速率趋于0,曲线有一下降的趋势。 B.细胞特点: 有害物增加，死亡数增加，细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物在此期产生，细胞内开始贮藏物质。稳定期细胞数目及产物积累达到最高。 * 衰退期 A 现象：细胞死亡速率 生长速率。一般总菌数不变,活菌数曲线下降。 B 特点： 死菌数多于活菌数，菌体变形，大小不一，细胞出现自溶,生理代谢活动停滞。 所有的发酵产品必须在进入死亡期以前结束发酵。 * 分批培养的优缺点 优点: 操作简单，周期短，染菌机会少，生产过程和产品质量容易掌握。 缺点: 产率低。劳动强度大，而且每批发酵的结果都不完全一样，对分离提纯造成了困难。 但由于操作相对较易，目前仍是发酵工业的主要方式。 * 1. 概念： 微生物培养到对数生长期时，在发酵罐中不断添加新鲜的培养基，同时不断放出代谢物，使微生物细胞在近似恒定状态下生长的发酵方式。 2. 特点： 连续发酵可使发酵罐内的液量维持恒定，微生物在稳定状态下生长。稳定状态可以有效的延长分批培养中的对数期。在恒定的状态下，微生物所处的环境条件如营养浓度、产物浓度、pH、微生物细胞的浓度以及生长速率等可以始终维持不变。 4.7.2 连续发酵 * 恒化连续发酵中控制适当的流速，使细胞消耗的营养及时得到补充，恒化器中的营养组成基本恒定，从而保持细胞的恒定生长速率。 恒浊连续发酵中，不断调节流入和流出的速度，保持培养液中的浊度基本不变。 连续发酵的类型 据控制方法 恒化连续发酵 恒浊连续发酵 * 多个发酵罐串联起来，前一罐的出料作为下一罐的进料；多级串联可以提高生产能力。 多级连续培养特别适用于细胞生长和产物合成的最佳条件不同的情况。 例如用葡萄糖-乳糖培养基培养生产?-半乳糖苷酶时，葡萄糖有利于菌体的生长，而酶的生产则受半乳糖的诱导，但葡萄糖又对半乳糖的利用产生阻遏作用。根据这一特点，靠采用二级连续培养。第一级用葡萄糖作为碳源，以获得大量菌体，第二级加入半乳糖，促进酶的生产。 据级数 单级连续发酵 多级连续发酵 * 连续培养的优缺点 优点: 1）可以保持恒定的操作条件，有利于微生物的生长代谢，从而使产率和产品质量保持稳定； 2）省去了反复放料、清洗、装料、灭菌等步骤，避免了延迟期，提高设备的利用率和单位时间产量； 3）发酵中各参数趋于恒值，便于自动控制； 4）易于分期控制，可以在不同罐中控制不同的条件； 5）大规模的分批发酵，需要大型的后处理设备，而连续发酵中，一次收获只获得少量发酵液，下游所需的设备规模也可相应减少。 * 缺点: a、长期连续培养会引起菌种退化，降低产量，染菌机会增加。 b、黏性丝状菌容易附着在器壁上生长和在发酵液内结成团，给连续发酵操作带来困难。 * 4.7.3 补料分批培养 介于分批培养和连续培养之间的操作方法。 1.概念：根据菌体生长和初始培养基的特点，在分批培养的某些阶段适当补加培养基，使菌体或其代谢产物的生产时间延长。 2.补料分批培养的优缺点 优点： (1)解除底物抑制和葡萄糖的分解阻遏效应。 (2)延长次级代谢产物的生产时间。 * (3)可以达到高密