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八年制分子生物考试总结（5400字） 基因：储存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息，以及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列所构成的遗传单位。 结构基因：基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列。 基因组：细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总称 原核生物的结构基因：是连续的，RNA合成不需要剪接加工。 真核生物结构基因：由外显子和内含子组成，编码序列不连续，为断裂基因 顺式作用元件：1.启动子和上游启动子元件2.反应元件3.增强子4.Poly(A)加尾信号 病毒基因组：1.不同病毒基因组大小相差较大2. 不同病毒基因组可以是不同结构的核酸3. 除逆转录病毒外，为单倍体基因组4. 病毒基因组有的是连续的，有的分节段5. 有的基因有内含子6. 病毒基因组大部分为编码序列7. 功能相关基因转录为多顺反子mRNA8. 有基因重叠现象 原核生物基因组的结构特点： 1. 基因组由一条环状双链DNA组成； 2. 只有一个复制起始点； 3. 大多数结构基因组成操纵子结构； 4. 结构基因无重叠现象； 5. 无内含子，转录后不需要剪接； 6. 基因组中编码区大于非编码区 7. 重复基因少，结构基因一般为单拷贝，rRNA的基因有多拷贝； 8. 有编码同工酶的等基因； 9. 基因组中存在可移动的DNA序列； 10.非编码区主要是调控序列 真核基因组的结构特点：1. 每一种真核生物都有一定的染色体数目；2. 远大于原核基因组，结构复杂，基因数；3. 真核生物基因转录为单顺反子；4. 有大量重复序列;5. 真核基因为断裂基因;6. 非编码序列多于编码序列;7. 功能相关基因构成各种基因家族。 五 基因表达：生物基因组中结构基因所携带的遗传信息，经过转录、翻译等一系列过程，合成具有特定的生物学功能和生物学效应的蛋白质的全过程。 基因表达的调控 ：机体各种细胞内相同的结构基因，根据机体的生长、发育、繁殖及环境变化的需要，有规律的选择性、程序性、适度地表达，以适应环境，发挥其生理功能。 乳糖操纵子的调控机制：1.乳糖操纵子的负调控 2.乳糖操纵子的结构3.乳糖操纵子的正调控 4.乳糖操纵子的复合调控 操纵子：由多顺反子转录单位与其调控序列构成 多顺反子：多个功能相关的结构基因串联成一个转录单位，由同一调控序列进行转录调节从而实现协同表达 反式作用因子：能识别和结合特定的顺式作用元件,并影响基因转录的一类蛋白质或RNA。 顺式作用元件：能影响基因表达，但不编码RNA和蛋白质的DNA序列。 原核生物基因转录起始的调控机制：1.0因子与转录起始的调控2.转录起始的负调控3.转录起始正调控4.复合调控 真核生物转录水平的调控机制：1.反式作用因子的活性调节2.反式作用因子作用方式：成环、扭曲、滑动、oozing 3.反式作用因子的组合式调控 转录后水平的调控：1.5′端加帽和3′端多聚腺苷酸化保护mRNA在转录过程中不被降 2.mRNA的选择性剪接 六 DNA修复：DNA修复是细胞对DNA受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新执行原来的功能，但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这种DNA的损伤而能继续生存。 碱基切除修复：指切除和替换由内源性化学物作用产生的DNA碱基损伤, 是切除修复的一种。 核苷酸切除修复：主要修复可影响碱基配对而扭曲双螺旋结构的DNA损伤，修复时切除含有损伤碱基的那一段 DNA 重组修复：根据 DNA 末端连接需要的同源性，分为 同源重组修复：需要多种蛋白参与,在 S/G2期起主要作用。 非同源末端连接：DNA分子之间不需要广泛的同源性，在G1/G0期起主要作用。 SOS修复：正在复制的DNA聚合酶可能遇到尚未修复的DNA损伤，即使细胞不能修复这些损伤，自动防故障系统能够使复制体绕过损伤部位，这一机制就是跨损伤DNA合成。 7： 双脱氧末端终止法原理：DNA合成反应中，ddNTP不存在3′-OH末端，故不能与下一个核苷酸的5′-磷酸基团形成3′，5′-磷酸二酯键，导致DNA新链的延伸提前终止于ddNTP 。 测序步骤：● 单链DNA模板的制备● DNA模板与测序引物退火● 掺入法标记反应 ● 延伸-终止反应● 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳● 放射自显影● 阅读测序结果 核酸分子杂交原理：标记的单链核酸探针与待检测的靶单链DNA或RNA局部互补结合形成杂交双链。 应用：核酸靶DNA或RNA序列的定性与定量分析。 Southern印迹杂交原理：将电泳分离的待测DNA片段结合到一定的固相支持物上，然后与存在于液相中标记的核酸探针进行杂交的过程 应用：DNA（基因组DNA）分子的定性或定量分析。 Southern印迹杂交基本过程 ：1. 制备基因组DNA 2.