不能被自身的限制性内切酶识别切割。.ppt

基因工程的基本概念 总结 掌握Ⅱ类限制性内切酶的性质、用途、使用方法、影响限制性内切酶活性的因素；掌握DNA连接酶的性质、种类、连接机理；常用的DNA聚合酶、修饰酶、核酸酶的性质及用途。 了解限制-修饰现象；Ⅰ类和Ⅲ类限制性内切酶；限制性内切酶的命名 思考题 什么是细菌的限制-修饰现象？ Ⅱ类限制性内切酶切割产生的末端类型有哪些？粘性末端有何实际意义？ 简述利用Ⅱ类限制性内切酶消化DNA的步骤？ 影响限制性内切酶活性的因素有哪些？ 使用限制酶应该注意哪些问题？ DNA连接酶有哪些性质，哪些种类？ 试述DNA连接酶的连接机理？ 影响DNA连接反应的因素有哪些？ 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和Klenow片段各有哪些性质及用途？ 什么是切口平移？ 简述T4 DNA聚合酶的酶活性、特点及用途？ 常用的单链和双链DNA外切酶有哪些？各有什么特点？ RNase H和RNase Ⅰ各有什么用途？ S1核酸内切酶的功能有哪些？ 末端脱氧核苷酸转移酶有哪些特性及功能？ T4多核苷酸激酶有什么功能、用途？ 碱性磷酸酶处理的载体为什么不会自连但能与外源DNA连接？ Bal31 分别用原内切酶切后电泳，判断片断数目和大小。 Hind III EcoR I BamH I Marker ① ?链 有反转录活性和 RNaseH活性。 RNaseH： ?链经过蛋白酶水解后产生的一条多肽。 以5’?3’或3’?5