石蜡包埋技术要点总结`.pptxVIP

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组织石蜡包埋和切片技术;程序;(二)杀死与固定? 利用药剂迅速把细胞杀死,以保持材料本来的状态和结构。 (三)脱水? 脱水的目的是除去组织中的水分,便于透明、浸蜡、包埋等步骤的进行,因为这些程序中所用的药品都不能与水混合,所以必须脱水。常用的脱水剂为酒精。脱水过程应缓慢进行,不能操之过急或时间过长,以免组织变硬变脆或发生收缩现象。脱水采用等级脱水(系列脱水),即从较低浓度酒精开始,逐渐替换到高浓度酒精。;(四)透明? 透明的目的是将脱水剂从材料中除去,使材料透明,增记折光系数;同时便于下步的浸蜡和包埋等程序(因为究竟不能溶解石蜡)。透明剂是一种既能与脱水剂混合,又能与包埋剂混合的药剂。常用的透明剂为二甲苯。;(五)浸蜡? 浸蜡的目的是逐渐除去透明剂,并为包埋剂所代替。常用的包埋剂是石蜡。浸蜡过程是使石蜡慢慢溶于浸有材料的透明剂中,溶解在透明剂中的石蜡渐渐深入到材料的细胞中去,最后使透明剂完全被石蜡取代,以便切片。? ;(六)包埋(埋蜡、沉床)? 材料浸蜡后再换两次已熔融的纯蜡,然后将材料和石蜡一起倒入提前叠好的包埋模具中,用加热的镊子迅速将材料按一定的间隔和所需的切面摆放整齐,同时用加热的镊子赶走材料周围的气泡,待模具表面的石蜡凝固后将纸盒平放入冷水中,使石蜡迅速凝固。最后从模具中取出蜡块,以便保存。注意将样品编号封于蜡块上,以免样品混淆。 ;(八)切片? 用切片机(如旋转切片机)将蜡块切成连续的蜡带。切片时先把切片刀夹在刀架上,再把载蜡器夹在固定装置上(注意安装切刀的角度,刀口运行方向与材料切面平行),然后调整好所需厚度,一般可在7~14微米,视材料和所需观察对象而定,转动切片机切片。;具体流程;2 透明: 二甲苯Ⅰ → 二甲苯Ⅱ ,每步15min. 注:在二甲苯的时间不宜过短或过长。时间过短引起透明不充分,影响后面渗透包埋;时间过长则引起组织变脆。 3 渗透: 石蜡Ⅰ (15-20min)→石蜡Ⅱ (20-30min)→石蜡Ⅲ(包埋),62℃。 ;4 包埋: 将组织放入盛有石蜡的模具中,摆好位置,于石蜡??埋机的冷台上冷却。 注:包埋时,切忌用手按石蜡盒中间,因为冷凝后,中间仍较软。何师兄放到—40℃冰箱使其快速凝固。 ?

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