Cav1.2及Cav3.1在犬左心室不同部位中表达比较.docVIP

Cav1.2及Cav3.1在犬左心室不同部位中表达比较 　【关键词】 腺病毒,犬；电异质性；逆转录聚合酶链反应 【Abstract】 AIM: To investigate the expressions of mRNA of ICaL and ICaT across the canine left ventricular wall and to explore the possible molecular mechanism and significance of electrical heterogeneity. METHODS: The mRNA expressions of the ICaL αsubunit Cav1.2, ICaT transcript Cav3.1 were quantified by semiquantitative RTPCR in tissue sections obtained from different regions of canine left ventricle including epicardium (Ep), midmyocardium (M) and endocardium （En）. RESULTS: The mRNA of Cav1.2 was expressed much more strongly in M and in En than that in Ep （Plt;0.05）, but there was no significant difference between M and En (Pgt;0.05). Cav3.1 mRNA was almost absent in Ep, while just a little in M and En. CONCLUSION: There are considerable variations of calcium channels across the canie left ventricular wall,which may be the molecular basis of the distribution of ICaL and ICaT, and may play an important part in the occurence and drug treatment of reentry arrhythmias. 【Keywords】 adenoviruses, canine；electrical heterogeneity；RTPCR 【摘要】 目的：研究犬左心室三层心肌L型钙通道（ICaL）、T型钙通道（ICaT）主要亚单位mRNA的表达情况，探讨其复极异质性的可能分子基础及意义. 方法：应用RTPCR半定量分析犬左心室外、中、内三层心肌ICaL α亚单位（Cav1.2）、ICaT主要的亚单位（Cav3.1） mRNA的表达量. 结果：Cav1.2 mRNA的表达在左心室中层、内层均明显高于外层（Plt;0.05），但在中层和内层之间无统计学差异(Pgt;0.05). Cav3.1 mRNA在外层几乎缺如，在中层、内层也只有少量表达且无明显统计学差异(Pgt;0.05). 结论：Cav1.2，Cav3.1 mRNA在犬左心室三层心肌中表达存在明显的差异，这种差异可能构成左心室三层心肌ICaL及ICaT分布差异的分子基础，在折返性心律失常的产生及药物治疗中可能起着重要的作用. 【关键词】 腺病毒，犬；电异质性；逆转录聚合酶链反应 0引言 近年来大量的电生理研究证实，在大多数哺乳动物的左心室存在明显的跨室壁复极离散，而且认为瞬间外向钾电流（Ito）是决定其电异质性的一个重要决定因素，这种复极异质性在某些折返性心律失常的产生中起着重要的作用［1-2］. 有报道［3］认为KchIP2基因是决定犬及人类左心室Ito异质性分布的基础. 最近又有研究发现,L型钙通道(ICaL)和T型钙通道(ICaT)在犬的左心室也存在明显的异质性分布，并认为也是形成左室电异质性的一个重要因素［4］，但构成左室ICaL，ICaT异质性的分子基础尚不甚明确. 我们旨在探讨ICaL的α亚单位Cav1.2及ICaT的主要亚单位Cav3.1 mRNA在犬左心室三层心肌中的表达情况，以明确其分子基础及意义. 1材料和方法 1.1材料健康成年杂种犬（20～25 kg） 6只（武汉大学医学院实验动物中心）；Taq DNA聚合酶、100 bp DNA marker （MBI公司）；DEPC （Sigma 公司）；Trizol （Invitrogen公司）；RNasin （Biostar International公司）；dNT