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- 2017-09-19 发布于河南
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疫苗种子的制备和菌株的保存 2
主题二 摇瓶种子的制备及菌种的保藏;带图象分析系统的微生物菌种显微观察装置 ;第三节 摇瓶种子的制备;1.摇瓶种子的制备工艺; (2)培养基配制
摇瓶种子以培养具有强生长活性的营养菌体为目的,因而在配制培养基时必须全面、均衡地满足菌体生长对各种营养物质的要求,包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
摇瓶种子在培养过程中一般不便于调节pH,故在培养基成分的选择时还应考虑培养过程中pH的稳定,可以通过生理酸、碱性物质的平衡搭配及加入磷酸盐、碳酸钙之类缓冲剂来实现。
分装培养基的三角摇瓶用棉塞或泡沫塑料塞口,置高压蒸汽锅内灭菌。
灭菌结束后要缓慢降压,以免培养基暴沸冲湿塞子。; (3)接种
摇瓶种子的接种一般采用斜面种子挖块法或米孢子粒计数接人法。
这种接种法难于掌握一致的接种量,可能影响摇瓶种子质量的稳定。
对接种量敏感的菌种,最好采用悬液接种法,即用无茵蒸馏水将斜面种子或米孢子粒上的细胞或孢子洗下,制成细胞或抱子悬液,然后按一定体积或一定细胞(孢子)数接种至摇瓶种子培养基中。
;(4)培养
摇瓶种子在恒温室内的摇床上进行培养。摇床分旋转式和往复式两种。
抗生素工厂常用的是旋转式。
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