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梯度洗脱HPLC法测定头孢唑肟钠有关物质 　【摘要】 目的 建立梯度洗脱HPLC法测定头孢唑肟钠的有关物质。方法 采用Diamonsil C18(4.6mm×150mm，5μm)色谱柱，0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用1mol/L磷酸调pH为4.0)为流动相A，甲醇∶乙腈∶水(250∶200∶50)为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml/min，检测波长254nm，柱温35℃。结果 头孢唑肟在1.0～31.7μg/ml范围内，浓度与峰面积呈良好线性关系，r=0.9999。结论 本法简便，准确，可定量测定头孢唑肟钠的有关物质。 【关键词】 梯度洗脱HPLC 头孢唑肟钠 有关物质 Determination of related substances in ceftizoxime sodium ABSTRACT Objective To establish a gradient elution HPLC method to determine the related substances of ceftizoxime sodium. Method Diamonsil C18 (4.6mm×150mm, 5μm) column was used. The mobile phase consisted of 0.01mol/L potassium dihydrogen phosphate solution (pH adjusted to 4.0 with 1mol/L phosphoric acid) as mobile phase A and methanol∶acetonitrile∶water (250∶200∶50) as mobile phase B. Gradient elution was used. The flow rate was 1.0ml/min. The detection wavelength was 254nm. The column temperature was 35℃. Results The calibration curves was linear within the range of 1.0～31.7μg/ml for ceftizoxime (r=0.9999). Conclusion This method was simple and accurate for determination of related substances in ceftizoxime sodium. KEY WORDS Gradient elution HPLC; Ceftizoxime sodium; Related substances 头孢唑肟钠是日本藤泽药品株式会社开发的半合成第三代头孢菌素，具广谱抗菌作用，对多种革兰阳性菌和革兰阴性菌产生的广谱β内酰胺酶(包括青霉素酶和头孢菌素酶)稳定，对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形菌等肠杆菌科细菌有较好的抗菌作用，临床用于治疗急性、中度呼吸系统感染和泌尿系统感染［1，2］。现已有多个国家的头孢唑肟钠原料进口，国内已有制剂产品上市。《中国药典》2005版二部未收载头孢唑肟钠原料的质量标准，USP29版［3］和JPⅩⅣ［4］均有收载，但USP29版未对有关物质进行要求，JPⅩⅣ则采用反相HPLC法同时进行含量测定和有关物质检查。为有效控制产品质量，对生产、运输及贮藏过程中可能产生的有关物质进行控制，本文参照有关资料，采用梯度洗脱HPLC法测定头孢唑肟钠的有关物质，取得满意结果。 1 仪器与试药 岛津LC10AT高效液相色谱仪，岛津SPD10A紫外可见分光光度检测器，CBM10A数据处理机，7725型进样阀等；头孢唑肟钠原料(含量958μg/mg)及对照品(纯度998.1μg/mg)均由印度Orchid公司提供；甲醇和乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为分析纯，水为去离子水经MilliQ plus纯水器处理。2 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱(4.6mm×150mm，5μm)；流动相A：0.01mol/L磷酸二氢钾(用1mol/L磷酸调pH为4.0)，流动相B：甲醇∶乙腈∶水(250∶200∶50)；流速1.0ml/min，梯度洗脱程序见Tab.1；检测波长254nm；柱温35℃；进样量10μl。 3 方法与结果 3.1 方法的专属性考察 酸破坏 取头孢唑肟对照品1mg，置10ml量瓶中，加1mol/L盐酸溶液1ml溶解，静置5min，用磷酸盐缓冲液(称取磷酸二氢钾3.63g，磷酸氢二钠10.73g，加水溶解并稀释至1000ml，pH7.0)稀释至刻度，摇匀。 碱破坏 取头孢唑肟对照品约1mg，置10ml量瓶中