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盐酸小檗碱脂质体稳定性考察 　 作者：谭丽蓉，李国强，陈俊威，苏炜，何丽庭 【摘要】 目的：考察盐酸小檗碱脂质体的稳定性。方法：采用离心分光光度法测定稳定性参数(ＫE)值；经典恒温加速试验法在25℃、30℃、40℃恒温条件测定盐酸小檗碱脂质体的包封率和含量；在(25±2)℃和(4±2)℃下留样观察，考察供试品外观及KE值，并通过测定酸值和过氧化值考察膜材磷脂的稳定性。结果：在4℃、25℃、30℃、40℃和(20±2)℃、光照条件下放置10 d的KE值较0 d分别增加了1.27、3.72、5.53、7.14和5.12倍，脂质体在高温条件下，包封率和含量变化很大，而4℃、90 d内性质比较稳定。结论：盐酸小檗碱脂质体的稳定性与温度有关，温度越高，稳定性越差，制成冻干粉保存较好。 【关键词】 盐酸小檗碱；脂质体；稳定性；恒温加速试验法 　　脂质体作为一种新型药物载体，具有体内降解、无毒性、无免疫原性和定向分布的靶向特点，可提高治疗指数，降低毒副作用，减少药物剂量，但脂质体自身稳定性差，在贮存过程中脂质体易产生聚集、降解、沉降、融合等作用，造成被包封药物的渗漏，极大地抑制了脂质体作为药物转运系统的应用。因此提高脂质体的稳定性是其商品化必须解决的一个重要问题。我们采用经典恒温加速实验法［1］对盐酸小檗碱脂质体的稳定性进行了研究，现将结果报道如下。 　　1 仪器和试药 　　1.1 仪器 UV2401型紫外分光光度计(日本岛津)［TGL16 G型离心机(上海安亭科学仪器总厂)［隔水式电热恒温培养箱(上海医疗器械七厂)；GB 204梅特勒电子天平(瑞士)。 　　1.2 试药 盐酸小檗碱脂质体(自制)；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法和结果 　　2.1 盐酸小檗碱脂质体的物理稳定性考察 脂质体在放置过程中会发生聚集而沉降，为了进一步了解脂质体的物理稳定性，以稳定系数(KE)［2］作为评价指标，采用离心分光光度法测定KE值，KE值越小，脂质体越稳定。经过预试，选择实验温度为25 ℃、30 ℃、40 ℃，试验期为10 d。自制3批盐酸小檗碱脂质体，分成5组，分别放置在4 ℃、25 ℃、30 ℃、40 ℃以及(20±2)℃、光照为(4 500±500)lx的条件下，分别于0 d、5 d、10 d取样，每式2份，1份取0.5 ml，另1份取1 ml于5 000 r/min离心10 min，从上部吸取离心后的脂质体0.5 ml，分别加蒸馏水稀释至5 ml，以蒸馏水为空白，分别于344 nm处测定其吸收度，按下式计算KE值，结果见表1。KE= (Ａ0Ａ)/ Ａ0(Ａ0和Ａ分别为脂质体离心前后吸收度值) 　　表1 不同温度及时间下的KE值（略） 　　结果显示，脂质体随着放置时间的延长，不断聚集，表现为浊度及KE值不断增大。4 ℃、25 ℃、30 ℃、40 ℃和(20±2)℃、4 500 lx时放置10 d的KE值较0 d分别增加了1.27倍、3.72倍、5.53倍、7.14倍和5.12倍。 　　2.2 盐酸小檗碱脂质体的化学稳定性预测 　　2.2.1 盐酸小檗碱脂质体的包封率和含量测定方法［3］ 精密吸取盐酸小檗碱脂质体1 ml，上样于用磷酸盐缓冲液饱和24 h的Sephadex G50柱，用磷酸盐缓冲液洗脱，流速为0.8 ml/min分离，分别收集盐酸小檗碱脂质体与游离盐酸小檗碱的洗脱液，在344 nm处测定吸收度，标准品对照法计算脂质体中盐酸小檗碱的含量。标准曲线方程为A=6.412×102C+2.540×103(r＝0.999 2),线性范围0.25 mg/L～16.0 mg/L，包封率＝［(C总C游离)/C总］×100％(其中C总为盐酸小檗碱的总量，C游离为脂质体包封盐酸小檗碱的量) 　　　2.2.2 加速试验 制备3批盐酸小檗碱脂质体，在25 ℃、30 ℃和40 ℃条件下，分别于0 d、5 d、10 d取样，测定盐酸小檗碱脂质体的包封率和标示百分含量，结果见表2。 　　表2 不同温度及时间下的包封率和含量变化（略） 　　加速实验显示，脂质体在高温条件下，包封率和含量变化很大。 　　2.2.3 长期试验 3批脂质体在(4±2)℃和(25±2)℃下留样观察，分别放置0 d、30 d、60 d、90 d后取样，考察供试品外观及KE值，结果见表3。 　　表3 不同温度及时间下的供试品外观及ＫE值（略） 　　留样观察结果表明，盐酸小檗碱脂质体在4 ℃、90 d内性质比较稳定。 　　2.3 膜材磷脂的稳定性 　　2.3.1 酸值的测定［4］ 量取盐酸小檗碱脂质体1.0 ml于锥形瓶中，加无水乙醇5.0 ml溶解，滴加酚酞1滴，用1.0 mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液滴定至粉红色，用新制备脂质体样品做空白，计算公式如下:H=MKOH×N