第八章节 吸光光度法.pptVIP

1、工作曲线(Calibration curve)法 配制一系列不同浓度的标准溶液，在选定条件下分别测定其吸光度。然后，以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制成如右图所示的工作曲线。在相同条件下，测定试样的吸光度后，从曲线上就可以找出相应的浓度。 工作曲线 2、比较法 在相同条件下（包括比色皿），测得标液和试液的吸光度分别为AS和 AX ，根据比尔定律（注意：比尔定律是指在其它条件都相同的情况下，吸光度与浓度的关系A C）： AS : AX = aS bScS : aXbXcX = CS: CX CX = 注意：应用比较法时，标准液的浓度和试液的浓度要相近，否则会引起极大大误差。 五、分光光度法的应用（略讲） * 第八章 吸光光度法 吸光光度法(Absorption spectrometry)是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。 §8－1 概述 一、光的基本性质（略） 二、吸收光谱的产生 吸收光谱有原子吸收光谱(Atomic absorption spectrum)和分子吸收光谱(Molecular absorption spectra)两种。 原子吸收光谱是由原子外层电子选择性的吸收某些波长的电磁辐射而产生的。原子吸收分光光度法(AAS)就是根据原子的这种性质建立起来的。(因超范围而不讨论) 分子吸收光谱比较复杂。这是由于分子结构的复杂性所致的。因为在同一电子能级中有几个振动能级，而在同一针对能级中又有几个转动能级。 因为电子能级间的能量差一般为1-20eV (1eV=1.6×10－19J)，而振动能级间的能量差仅为0.05-1eV，至于转动能级间的能量差就更小了(小于0.05eV)。所以 ，在电子能级跃迁(Transition)的同时，必然伴随着振动能级和转动能级的跃迁。因此，分子的电子光谱通常呈带状，称为带状光谱(Band spectra)。显然，分子的带状光谱要比原子的线状光谱(Line spectrum)复杂得多。 由电子能级跃迁而产生的吸收光谱位于紫外及可见区。这种由价电子跃迁而产生的分子光谱称为电子光谱(Electronic spectra)。 V0′ V1′ r1 r2 r3 r1 r2 r3 r1 r1 r2 r3 r3 r2 V0 V1 A B C Energy Rotational energy leverls Vibrational energy levels Electronic energy levels Excited state Ground state A: pure rotational changes (far infrared) B: rotational-vibrational changes (near infrared) C: rotational-vibrational-electronic changes transitions (visible and ultraviolet) 三、光与颜色 波长在200~400 nm(nanometers)范围内的光称为紫外光(Ultraviolet light)。人眼能感觉到的光的波长在400~750 nm之间，称为可见光(Visible light)。可见光是一种复合光，它是由赤橙黄绿青蓝紫等各种单色光(Monochromatic light)按一定的比例混合而成的。 显然，不同颜色的单色光，其波长范围也不同。物质的颜色正是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生的。例如，CuSO4溶液因吸收了可见光中的黄色而呈蓝色；而 KMnO4溶液因吸收了可见光中的黄绿色而呈紫色。可见，物质的颜色是由它所反射或透过光的颜色来决定的。注意：课本p.128的论述不够确切。 表8-1 物质的光和吸收光颜色的关系 650~750 红 青 600~650 橙 青蓝 580~600 黄 蓝 560~580 黄绿 紫 500~560 绿 紫红 490~500 青 红 480~490 青蓝 橙 450~480 蓝 黄 400~450 紫 黄绿 吸收光波长 吸收光颜色 物质的颜色 值得注意的是，科学实验证明：不仅赤橙黄绿青蓝紫七种单色光可以混合成白光，也可以把两种适当的单色光按一定比例混合成白光。两种能混合成白光的单色光称为互补色光。 白光 绿 紫 橙 青蓝 蓝 青 红 图8-1 光的互补色示意图 黄 四、光吸收曲线 如果测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸光度(Absorb