ELISA简介及HIV抗体筛查实验质量管理-10.pdf

ELISA简介及 HIV抗体筛查实验质量管理 太原市疾病预防控制中心 王骥涛 1/15/2014 ELISA简介 原理 方法类型 操作要点 1/15/2014 ELISA原理 基础 活性 相关 抗原或抗体的固 固相载体表面的抗原或抗体 免疫学活性 酶量与标本 相化及抗原抗体 酶标记的抗原或抗体 中受检物质 的酶标记 的量 酶的活性 1/15/2014 ELISA方法类型 检测抗原 竞争法 检测抗体 间 捕 双 双 接 获 抗 抗 法 法 原 体 夹 夹 心 心 法 法 1/15/2014 常用ELISA法 双抗原夹心法测抗体 双抗体夹心法测抗原 捕获法测抗体 间接法测抗体 竞争法测抗原\抗体 1/15/2014 用于检测HIV抗体的ELISA法 第一代：使用HIV全病毒裂解物为抗原，应用 间接法原理检测HIV抗体。如日本富士公司生 产的HIV-PA试剂。 第二代：使用在细菌或真菌中表达的人工重组 或化学合成多肽HIV抗原，应用间接法原理检 测HIV抗体。基因重组通常易于在培养基中生 产大量同源性抗原，产品为单一目的基因而非 多样性抗原混合，特异性高于第一代试剂。 1/15/2014 用于检测HIV抗体的ELISA法 第三代：使用合成多肽HIV 抗原（少数用重组抗原）， 应用双抗原夹心法原理检 酶标记的HIV-1/-2型抗原 测HIV抗体。由于标记HIV 抗原可同时检测血清中 待检抗体 HIV-1 IgG、IgM、IgA抗 体，此类试剂的敏感性和 高纯度的HIV-1/-2型抗原 特异性均优于标记抗人免 疫球蛋白的间接法。 1/15/2014 用于检测HIV抗体的ELISA法 第四代：此类试剂在第三代试剂盒基础 上，将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原 一起包被固相载体，可同时检测HI