ZnCl2阻断电压门控质子通道对缺氧后小胶质细胞-中国细胞生物学学报.PDFVIP

ZnCl2阻断电压门控质子通道对缺氧后小胶质细胞-中国细胞生物学学报.PDF

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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(7): 829–835 DOI: 10.11844/cj cb.2016.07.0013 临床细胞生物学 ZnCl 阻断电压门控质子通道对缺氧后小胶质细胞 2 产生活性氧及促炎因子的影响 余 颖 喻志源 谢敏杰 王 伟 骆 翔* (华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科, 武汉430030) 摘要 为明确电压门控质子通道(voltage-gated proton channel, Hv 1)对小胶质细胞的影响, 研究了Hv 1在正常、激活及抑制后对小胶质细胞活性氧、促炎因子产生的影响及机制, 该研究使 用原代培养的小胶质细胞, 利用免疫荧光染色明确Hv 1表达。用Hv 1非特异性抑制剂ZnCl 阻断该 2 通道, 用DCFH-DA 染色、Real-time PCR观察糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation, OGD)处理后 α tumor α 小胶质细胞产生活性氧(reactive oxygen species, ROS) 、肿瘤坏死因子- ( necrosis factor- , TNF-α β β IL-1β ) 、白细胞介素-1 (interleukin-1 , )水平的变化。采用Western blot检测Hv 1和Nox2蛋白 质水平。实验结果显示, 小鼠脑部小胶质细胞可检测到Hv 1通道的表达; 单纯ODG组缺氧后小胶 质细胞ROS、TNF-α 、IL-1β的产生明显增加; 而OGD加ZnCl 干预组, 小胶质细胞ROS、TNF-α 、 2 β IL-1 的产生较单纯OGD组显著降低; Western blot显示, OGD导致小胶质细胞中Hv 1和Nox2蛋白质 水平显著增加。以上结果表明, 小鼠脑部小胶质细胞存在Hv 1通道蛋白质, ZnCl 阻断该通道可降 2 α β 低OGD诱导的小胶质细胞ROS和TNF- 、IL-1 的产生, 该抑制作用可能与其抑制NADPH氧化酶 的作用相关。 关键词 小胶质细胞; 电压门控质子通道; 活性氧; 促炎因子 The Effect of Blocking Voltage Gated Proton Channel Hv1 by ZnCl on 2 Production of ROS and Inflammatory Factors in Microglia Yu Ying, Yu Zhiyuan, Xie Minjie, Wang

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