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细菌的遗传重组 -----细菌的接合 接合(conjugation) 细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌的过程。 接合现象的证据 1946 J. Lederberg和E. L. Tatum 不同营养缺陷型的E. coli: A菌株: Met- bio- thr+ leu+ thi+ 甲硫氨酸、生物素缺陷 B菌株: Met+ bio+ thr- leu- thi- 苏氨酸、亮氨酸、硫胺素缺陷 A、B菌株分别接种基本培养基 中,均不能生长。 A、B菌株混合于完全培养基中 培养几小时,离心除去培养基,再 涂布于基本培养基中,出现原养型 菌株(Met- bio- thr+ leu+ thi+ ), 且概率为10-7 。 假设与猜测 (1)亲本发生回复突变。 (2)细菌细胞没有接合,只是交换DNA,可能是转化的结果。 (3)混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充,即交换养料得以在基本培养基中生长。 (4)细菌接合后发生基因重组。 推翻与验证 (1)亲本发生回复突变。 选用细菌为多重营养缺陷型,A菌株要回复突变为原养型,必须两个基因同时发生回复突变,概率为10-14;B菌株需要三个基因同时发生回复突变,概率为10-21。 与实际的原养型菌株出现概率10-7不符,推翻假设(1)。 假设与猜测 (1)亲本发生回复突变。× (2)细菌细胞没有接合,只是交换DNA,可能是转化的结果。 (3)混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充,即交换养料得以在基本培养基中生长。 (4)细菌接合后发生基因重组。 推翻与验证 (2)细菌细胞没有接合,只是交换DNA,可能是转化的结果。 将含A菌株的培养液灭菌, 加入含B菌株的培养液中培养, 结果没有发现原养型菌落, 说明原实验并非转化的结果,推翻假设(2)。 假设与猜测 (1)亲本发生回复突变。× (2)细菌细胞没有接合,只是交换DNA,可能是转化的结果。× (3)混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充,即交换养料得以在基本培养基中生长。 (4)细菌接合后发生基因重组。 推翻与验证 (3)混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充,即交换养料 得以在基本培养基中生长。 压或吸 任何一臂的培养基上 均未长出原养型细菌。 推翻假设(3); 证实:直接接触(接合) 是原养型细胞出现的 必要条件。 假设与猜测 (1)亲本发生回复突变。× (2)细菌细胞没有接合,只是交换DNA,可能是转化的结果。× (3)混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充,即交换养料得以在基本培养基中生长。× (4)细菌接合后发生基因重组。√ (Hages, 1952)通过实验证明: 结合过程中,遗传物质的转移是单向的(异宗配合), A菌株 B菌株,从供体(即雄性) 到受体(即雌性)。 遗传物质的单方向转移 遗传物质 研究发现决定细菌性别的是致育因子——F因子。 F+菌株:细胞质中具有F因子的细菌,作为供体(雄性),提供遗传物质。 F-菌株:细胞质中没有F因子的细菌,作为受体(雌性) ,接受遗传物质。 F+ F因子 大肠杆菌DNA F- F因子的特征 环状双链DNA质粒,约为大肠杆菌染色体的2%。是细菌的一种附加因子,它的存在使宿主具有供体的能力。它由原点、致育基因、配对区三个部分组成。 F因子各部位功能 原点:是转移的起点和2个复制起点。 配对区:此处与大肠杆菌DNA多处核苷酸序列相对应(即同源序列),故可
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