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2017-10-01 发布于北京
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hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位.pdf

ofChinaMedical V01．38N0．11Nov．2009 Journal University nLMO了编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位蔡鑫泽1，顾卉2，刘彤2，李丰2 10001) (中国医科大学1。附属第一医院中心实验室；2。基础医学院细胞生物学教研室，卫生部细胞生物学重点实验室，沈阳1 摘要：目的构建hLM01真核表达栽体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板，PCR扩 HEK293细胞中，提取细胞蛋白进行Western blot检测到了融合蛋白位。结果hLMOI基因cDNA全长克隆到了真核表达栽体pEGFP中，酶切鉴定片段为471bp。Western 表达，分子量约为45kDa。pEGFR．LM01在人HEK293细胞核与细胞质均有表达。结论的真核表达载体，pEGFP．LM01蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内。关键词：hLMOJ基因；质粒构建；基因表达与定位中图分类号：Q257 文献标志码：A 文章编号：0258—4646(2009)11-0816—04 of PlasmidofHumanLM01Gemandthe and of ConstructiontheRecombinant Expres豳n FusionProtein CAI Xin—zel，GUHui2,LIU Tong，LIFen萨 Affiliated 0f Cell ofPublicHealthof (1．Central First Cell China， Laboratory，The Hospital；2．DepartmentBiology，TheKeyklb啪呻ofBiology，Ministry ofBasicMedical Medical College Sciences，ChinaUniversity，Shenyang110001，China) of LIM and and Toconstructthe humandomain the Abstract：Objective expressionplasmid only1(hLM01)geneidentifyexpression localizationofitsfusion ThehLM01 was chainreaction cDNA codingsequence bypolymerase byusins fibrary protein．Methods amplified derivedfromhumanfetalbrainas．the andsttbclonedinto vector．Afterthe WO．Sidentified targetre,on enzyme template pEGrR by