凡纳滨对虾不同组织内SOD、POD酶的细胞化学定位.pdfVIP

第34卷第2期 水生生物学报 V01．34．No．2 20lO年3月 AClAHYDROBIOLOGICASINICA Mar．．201 O DOI：10．3724／SP．J．1035．2010．00402 凡纳滨对虾不同组织内SoD、PoD酶的细胞化学定位 许 燕1 杨 洁1 孙静秋1 俞亚东1 叶军强2 (1．上海师范大学生命与环境科学学院，上海200234；2．上海奉贤区水产技术推广站，上海201400) 摘要：运用电镜酶细胞化学技术对凡纳滨对虾(￡ffopP行口P坩v口行栉口mgf)体内肝脏、肌肉、心脏、复眼和鳃等5 种组织的sOD和POD酶的细胞化学定位进行了研究，并与感染病毒的凡纳滨对虾体内5种组织中SOD和 POD的细胞化学定位进行比较。结果显示，在健康对虾体内，s0D酶阳性反应颗粒主要定位于肌肉、心脏、 肝脏和鳃等组织细胞的线粒体膜、细胞质中，以及肝细胞的脂滴周围；POD酶主要定位于心脏、鳃和肝脏组 织细胞的过氧化物酶体内，肝细胞中脂滴周围也有POD的阳性反应颗粒。感染病毒后，各组织细胞表现出 明显的病理性结构变化，大量的髓样小体出现，脂滴数量明显减少。同时各组织中sOD和POD酶的细胞化 学定位也发生了明显的变化，表现为心脏、鳃、肌肉组织细胞胞质中的SOD阳性颗粒消失，肝细胞中的sOD 阳性颗粒明显减少，在心脏和鳃的线粒体基质内也出现sOD阳性颗粒；POD仍主要定位在过氧化物酶体中。 但心脏中的过氧化物酶体解体而有许多呈阳性反应的小颗粒分布在细胞质中。结果表明sOD和POD在凡 纳滨对虾防御氧的毒性损伤以及整个机体的免疫功能等方面起着重要的作用。 关键词：凡纳滨对虾；病毒；s0D；POD；细胞化学定位 中图分类号：Q955 文献标识码：A 文章编号：l000-3207(2010)02．0402．08 凡纳滨对虾∞枷p鲫口P掰v口，f开口mPD俗称南美白位及感染病毒后的定位变化研究国内外尚未见报道。 对虾，是我国主要的经济水产养殖虾类，然而随着 本文采用电镜酶细胞化学技术，以健康和患病毒病的 养殖面积的不断扩大、养殖强度的不断增加、养殖 凡纳滨对虾为材料，在透射电镜下观察其肝脏、肌肉、 生态环境的不断恶化，凡纳滨对虾的病害也日趋严 心脏、复眼和鳃等5种组织中SOD、POD这2种免疫 重，其中病毒是对虾暴发性流行病发生的主要病原 相关酶在细胞内的酶活性反应部位，比较分析感染病 因子【l】。而提高对虾的自身免疫力，增强其抗病机能 毒前后虾体不同组织中SOD、POD的定位变化，为进 是综合防治的根本措施之一【2】，因此研究凡纳滨对 一步认识凡纳滨对虾体内各组织细胞中SOD、POD的 虾的免疫因子，有效提高对虾本身的抗病能力，已 免疫作用提供基础资料，并为凡纳滨对虾病毒性疾病 经越来越受到人们的重视。 的预防与诊断提供科学参考。 超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)是广 1材料与方法 泛存在于需氧和耐氧生物各组织中的二种重要的抗氧 化酶，在对甲壳动物的研究中，已把sOD和POD看作 1．1材料 是两种具有免疫功能的酶，可与其他一些酶共同作为 2006年7、8月虾病流行期间，从上海市奉贤区 检测甲壳动物免疫功能的指标酶【2一】。以前这方面的 水产技术推广站获取典型的患病毒性疾病的凡纳滨 研究工作多以测定血清和组织提取液中酶活性为手段， 对虾和健康的凡纳滨对虾成体，体长为7—8cm。 而对其在甲壳类动物组织细胞中的存在部位和和形成 1．2方法 方式报道很少【5q】。有关凡纳滨对虾体内肝脏、肌肉、 样品制备 按健康凡纳滨对虾和感染病毒的 心脏、复眼和鳃等5种组织中这两种酶的细胞化学定 凡纳滨对虾分成两组，每组各10只，活体解剖，分别 收稿日期：20