禽传染性支气管炎疫苗开发所面临的发展与挑战.PDFVIP

总第21期/2015年5月 禽传染性支气管炎疫苗开发所面临的发展与挑战 Faruku Bande, 1,2 Siti Suri Arshad,1 Mohd Hair Bejo, 1,3 HassanMoeini,4 and Abdul Rahman Omar1,3 禽传染性支气管炎(IB)是一种分布广泛的家禽疾病，对家禽业造成了巨大的经济影响。新的IBV基因型不断出现和不同IBV 基因型之间缺乏交叉保护是IBV疫苗防控中的主要难点。虽然减毒IB活疫苗可有效诱导保护性免疫反应,但毒力返强的潜在风 险,母源抗体的中和效应,重组以及突变的发生使得人们使用弱毒疫苗时存在担忧。另一方面,灭活疫苗诱导的免疫反应较弱, 可能需要多剂量注射和/或佐剂的使用,存在潜在的安全风险,增加了经济负担。因此,需要寻求其他替代IB疫苗。DNA重组技 术的进步使试验性IB疫苗显示出与减毒活疫苗类似的抗体水平和T细胞反应。同时也增强了重组DNA疫苗针对多个血清型的能 力，通过载体、纳米佐剂及胚内疫苗免疫方法的应用，其免疫效果得到了改善。尽管大多数IB重组DNA疫苗尚未获得许可,该 类型的疫苗可能有望通过诱导多个IBV血清型的交叉保护掌控未来疫苗市场。 1．背景 禽传染性支气管炎(IB)是一种重要的家禽疾病，侵害鸡的呼吸道、肾脏和生殖系统，造成经济损失。虽然IB首次发现于 美国的NorthDakota[1],流行病学调查显示，在世界不同地区存在多种IBV血清型。目前,大多数国家都存在经典和变异IBV血 清型,从而使IB的控制和预防成为全球挑战[2、3]。该疾病可造成产蛋下降,增重缓慢,发病率高，从而造成巨大的经济损失。 青年鸡感染后死亡率高，尤其是在其他并发症如病毒和细菌感染存在的情况下[4]。 接种疫苗被认为是控制IBV感染最有效的方法[5]。然而,这种方法一直受到若干因素的限制：包括新IBV血清型的出现(目 前有超过50种的突变株)，这些血清型之间很少或没有交叉保护[6]。重要的是,一些原本有效的IBV株疫苗可能对新的变异株 没有效果,因此需要开发新的疫苗[5]。直到最近,大多数IBV疫苗仍然是基于经典毒株或变异株的减毒活疫苗或灭活疫苗。这 些疫苗所使用的毒株来自美国，如M41,Ma5、Ark、Conn，和荷兰,例如,H52和H120,以及欧洲，如793/B，CR88,D274。然而研 究表明,包含这些毒株的疫苗的免疫应答往往较差，特别是对当地的毒株。IB减毒活疫苗也被证明有助于新的致病性IBV突变 株的出现[7、8]。值得注意的是,最初在中国出现的QX-like毒株的地理分布和组织嗜性发生了变化,在亚洲[9], 俄罗斯[10] 和欧洲[11-14]等地广泛传播，给家禽饲养者造成巨大的经济损失。本文旨在描述与IBV疫苗相关的发展和挑战。并对病毒引 起的免疫应答的某些方面进行了讨论。 2 ．综述 2.1 病原学和基因组特征 禽传染性支气管炎病毒(IBV),与火鸡冠状病毒和白鲸冠状病毒共同属于Nidovirales病毒目，冠状病毒科的 Gammacoronavirus。虽然抗原性上有所不同，冠状病毒科的成员,如SARS和MERS，都具有冠状病毒的共同结构蛋白组成。冠 状病毒的基因组是由单链有囊膜的RNA组成,大小为27-32kb,是最大的RNA病毒[15]。尤其是IBV，其病毒粒子平均直径为 80-120nm，表面有长约20nm的高度糖基化的杆状纤突。IBV基因组中有四个编码不同结构蛋白的基因。纤突蛋白(S),小包膜 蛋白(E),基质糖蛋白(M),和核蛋白(N)。结构蛋白基因之间为基因编码的非结构辅助蛋白,顺序从5’端到3’端依次 UTR-1a/1ab-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-3-UTR-poly(a)。 结构蛋白基因中,S1和N蛋白含有与宿主免疫应答相关的抗原表位(图1)。 (a) (b) 图1:禽传染性支气管炎病毒Massachusetts 株S1糖蛋白(a)和核蛋白(b)蛋白质三维结构预测。使用网上SWISS 同源结构分析绘制结 构。/。 2.2 糖蛋白 S蛋白为高度糖基化的跨膜蛋白,包含1160个氨基酸,大小为150-200kDa。它包含一个裂解信号序列,一个跨膜域和一个短 的C端尾部[17]。IBV S蛋白由3400个核苷酸构成，转译后裂解为氨基端的S1(520个氨基酸残基