隐球菌实验室检测.pdf

隐球菌的实验室检测 杨启文 北京协和医院 IFD的诊断和治疗 2 微生物学证据-临床诊断  镜检： 以下任一病灶处查见丝状菌：痰、肺泡灌洗液、支气 管毛刷、窦道析出物  培养： 以下任一病灶处查见丝状菌：肺泡灌洗液、支气管毛 刷、窦道析出物  抗原检测： G试验（血浆、血清） GM试验（血浆、血清、BALF、CSF ） 3 微生物学证据-确诊  镜检： 无菌病灶处、病理切片  培养： 以下任一无菌病灶处培养阳性：CSF、组织、无菌病 灶引流液、血 （BALF、颅窦标本、尿中培养出真菌不能确诊）  抗原检测： 隐球菌抗原 4 实验室诊断方法  直接镜检+组织病理  真菌培养+鉴定  血清学  分子生物学 涂片镜检 隐球菌镜检  KOH 10-20% ：皮肤标本/痰  革兰染色：多染为革兰阳性  六胺银染色  墨汁染色 真菌镜检 真菌镜检 W7612 CSF 墨汁染色， W7612 CSF 革兰染色， 隐球菌 隐球菌 真菌镜检  某些真菌病可通过显微镜直接检查确诊 如：卡氏肺孢子菌孢囊的检测  错误的阳性结果也会出现： 如：墨汁染色中溶解的淋巴细胞错误认 为新型隐球菌 脂肪滴容易与出芽酵母细胞混淆 10 真菌培养 真菌培养 12 真菌培养-不同接种方法 隐球菌培养 培养基：SDA、脑心浸液琼脂 （血平皿、巧克力平皿也生长） 孵育温度：25-30度 鉴定方法：生化鉴定，质谱鉴定，基因测序 Page 14 抗真菌药物抗菌谱 15 抗原检测 IFIs血清学检测方法 真菌 抗原、抗体、酶、代谢产物 标本类型 真菌（除外接合 (1,3)-β-D-葡聚糖 血清、血浆 菌和新型隐球菌） 曲霉 半乳甘露聚糖（GM ） 血清、BAL （CSF? ） 新型隐球菌 荚膜多糖抗原 血清、CSF 念珠菌 甘露聚糖、甘露聚糖抗体