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痰培养操作 经验分享 （微生物之家论坛巴斯德之徒） 卢先雷 你准备好了吗？  痰培养，微生物界公认的硬骨头，21世纪 微生物检验领域的“哥德巴赫猜想”  面对这个头痛的难题，你打算怎么办呢？ 是继续迷茫，继续观望等待？还是拒绝谈 论痰培养，绕过去？  选择保守，得过且过，还是选择变革，逆 水行舟？所有的主动权都在你的手里！  心动不如行动，加入我们，一起攻克世纪 难题！ 痰培养操作流程 肉眼筛选 样本接收 镜下筛选 痰液洗涤 分类 压片法制 首代培养 痰液接种 痰液消化 片 目标菌落 染色镜检 选取 鉴定药敏 综合报告 样本接收  样本标识与病人基本信息  申请单内容与样本类型核对  样本外观与容器密封性检查 肉眼筛选  合格标本(脓性) ：黄色、灰色、血性、铁锈 色，浑浊、稠厚，呈现团块状的标本；  不合格标本(唾液性) ：无色、白色、有黑色 小点，清稀，呈现泡沫状，有明显食物渣 滓、纸屑灰尘、泥土的标本。  混合性标本：既有脓性成分又有唾液成分 的痰标本 镜下筛选  混合性标本：  先进行洗涤，分离出脓性成分，再镜检  脓细胞25/HP且复层鳞状上皮10/LP的标本 为合格标本，可进入下一步程序；而脓细胞 10/HP或复层鳞状上皮25/LP的标本为不合 格标本，应拒收。  儿科痰标本：  直接镜检做细胞学筛查 痰液洗涤  按《全国临床检验操作规程》（第二版） 相关章节，采用先用20ml生理盐水洗涤两 次，再加入10ml生理盐水稀释  视屏： 压片法制片  视屏： 改良手法革兰染色  视屏： 显微镜检验  镜检原理：*免疫学原理  镜检方法：先低倍镜再油镜，收寻20~30个视野中 脓细胞聚集处，集中而不稠密，且周围无鳞状上皮 细胞或无大量成团状分布的细菌球的区域为读片区  镜检内容：认真收寻脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌， 或者结节状脓细胞团块中有无菌丝的包裹，记录细 菌的染色排列特征，菌体特征（如粗细、长短、扭 曲） 注意区分粘附于吞噬 注意辨认经抗生素治疗后形态变异了的细菌（小球体、 巨球体、丝状体、斑驳染色） *镜检的免疫学原理  人体生理腔道粘膜中、粘膜下，以及无菌 部位分布的免疫细胞细胞膜上的Toll样受体 种类及分子多态性程度不同。  粘膜中，由于菌群建立过程，伴随着免疫 耐受过程的形成，这些部位Toll样受体种类 相对单一，分子多态性程度低，可识别的 异源性分子种类少，因而对多数正常菌群 产生免疫耐受，表现为无应答  粘膜下以及无菌部位免疫细胞细胞膜上Toll样 受体种类繁多，分子多态性程度高，可识别的 异