G蛋白偶联雌激素受体(GPR30)激动剂G-1抑制人主动脉平滑肌细胞迁移作用地的研究.pdfVIP

第一章引言 导意义【12】! 第二节雌激素受体GPR30 1．2．1经典的雌激素受体 目前，两种雌激素受体ER(Eestrogenreceptor)亚形已经确定，ER—a、 ER．p2、ER．p3[14】。报道显示，ER．0【受体能促进雌激素对血管损失的保护反应[15]， 然而ER．p受体比ER．q受体在人体分布更广泛，而且ER．p受体是表达于人尤 mRNA的诱导表达出现于雄性大 其是女性平滑肌细胞的主要受体形式【l3|。ER．B 鼠主动脉球囊血管损伤后，转染Hela细胞实验表明，在低受体浓度下ER．0【对 于17．雌二醇(E2)的反应相较于ER．B是一种更强的转化激活因子；高受体浓 度下ER．a活性减弱，ER．p则成为更强的转化激活因子。这些结果表明ER．p 5J。 受体在雌激素对于血管的直接作用及调节血管功能中的地位[1 雌激素对心血管系统影响机制之一是通过经典途径。细胞对于雌激素及雌 6|，被称为基因组信号传 激素复合物的反应是由细胞核雌激素受体ERs介导的[1 导途径。ERs受体定位于细胞核，是配体激活的转录因子。经典的雌激素核受 体机制是雌激素穿过细胞膜与核受体结合形成受体复合物，复合物二聚化后结 合到靶基因上的雌激素受体反应元件(EREs)【l7|，从而启动目的基因转录。雌 激素与受体结合过程中会发生受体配基结合位点构象变化，这种构象变化有利 于激活蛋白的结合[1引。人体大约三分之一的基因都通过ERs调节表达，ERs调 节基因表达的机制有很多，还可不直接结合靶基因DNA，而通过细胞核中蛋白 91。雌激素的一些 一蛋白相互作用调节其他转录因子的功能从而调节基因表达[1 反应很快并不依赖于RNA转录和蛋白的合成，被称为非基因组信号传导途径， 是由膜受体介导的一系列蛋白酶联级激活反应。雌激素的非基因组途径可能间 接的影响基因表达，通过激活信号转导通路，最终启动目标基因转录【2川。 1．2．1新型雌激素受体GPR30 1．2．1．1GPR30结构、分布 3 第一章引言 GPR30作为一个7跨膜受体被多个研究团队首次发现于90年代。GPR30 个氨基酸的蛋白。基因测序得知，GPR30作为GPCR家族一员，其最高同源性 为30％【2¨。GPR30在人体组织广泛表达，如肝脏、胰腺、胎盘、骨骼肌、平滑 21。 肌等，研究发现其在卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌等恶性肿瘤组织如中过量表达【l 另有研究发现，MCF．7细胞中孕激素可上调GPR30表达，这对于孕激素介导 的生长抑制具关键作用[221。GPR30被证实能促进雌激素介导的抑制氧化作用而 D蛋白促进细胞生长【231，刺激巨噬细胞中神 诱导的细胞凋亡，通过上调cyclin 经生长因子的产生及上调乳腺癌细胞中c．fos基因的表达。以上结果显示GPR30 可被雌激素激活从而调节细胞生长、增殖、迁移、凋亡【2引。 1．2．1．2 GPR30亚细胞定位 (猴肾脏成纤维细胞)中表达，在共聚焦显微镜下观察GPR30的表达，结果显 示其定位于细胞内的微管网络上。亚细胞标记显示这个区域位于内质网和高尔 于以下两个依据：1)内源性表达的GPR30以环形染色模式存在于SKBr3乳腺 癌细胞；2)氚标记的雌激素结合位点独立在于细胞膜上。Funakoshi等研究也 认为GPR30定位于细胞膜[261。目前，关于GPR30定位一直没有定论，有研究 认为GPR30的亚细胞定位随细胞、组织类型及培养环境变化。尽管多数GPCRs 表达于细胞膜，但是越来越多证据显示GPCRs在细胞内网络显示出功能性作用 【27]。 1．2．1．3 GPR30特异性配体 雌激素能够结合并激活经典雌激素受体ERs及GPR30，但是