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0406 细胞及冻存、复苏和运输
Chapter 4 Animal Cell Culture;Section 5:细胞的冻存、复苏和运输;2.细胞复苏;细胞的冻存与复苏;冷冻速率:慢冻(?)
复苏速率:快融(?)
冷冻保护剂:5-15%甘油或二甲基亚砜(DMSO) (?)
冷冻保存温度:-196 ℃(液氮);对大多数有核哺乳类动物细胞来说,在不加冷冻保护剂的情况下,无最适冷冻速率可言,也不能获得活的冻存物。
目前冷冻保护剂可分为渗透性和非渗透性两类。
具有渗透性的冷冻保护剂可以渗透到细胞内,一般是一些小分子的物质,主要有甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等,。
非渗透性冷冻保护剂不能渗透到细胞内,一般是些大分子物质,主要有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、羟乙基淀粉等。 ;冻存和复苏的原则:慢冻快融;冻存和复苏的原则:慢冻快融;冻存和复苏的原则:慢冻快融;冻存和复苏的原则:慢冻快融;3.细胞的运输;1、体外培养细胞有哪些类型?什么是细胞系、细胞株?
2、细胞系的生长过程包括哪些主要阶段?每一生长阶段各有什么特征?
3、每代细胞的生长曲线包括哪几个主要时期?各期细胞有什么特点?
4、培养细胞与体内细胞相比发生了哪些变化?
5、什么是天然培养基、合成培养基和无血清培养基?无血清培养在实验研究中有什么特殊意义?
6、简述原代培养中的组织块培养法的基本过程。
7、贴壁细胞传代时采用何种方法,其技术关键是什么?
8、简述细胞冻存和复苏的技术要点。;细胞培养技术.rm
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