实验三 脑脊液蛋白质定性检查.pptx

实验三 脑脊液蛋白质定性检查; 一、潘迪试验 【目的】 掌握脑脊液蛋白质定性潘迪试验的方法。 【原理】 脑脊液中球蛋白及苯酚结合，形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀，浑浊的程度与球蛋白含量相关。;【操作】 1．加试剂 2．加标本 3．观察结果 4．判断结果 5． 报告方式 ; 【注意事项】 1．实验所用的试管应选择小口径的试管为宜，内径一般为12mm左右，加入试剂后立即观察。所用的试管和滴管必须洁净，否则易出现假阳性。 2．苯酚不纯可引起假阳性，当室温在l0℃以下时，应将酚试剂保存在37℃温箱中，否则饱和度降低，可致假阴性结果。 3．因穿刺出血，标本中如红细胞过多，应离心沉淀取上清液检测；标本有血清蛋白混入可引起假阳性。 4．可在正常脑脊液或配制及正常脑脊液基本成分相似的基础液中加不同浓度的球蛋白作考核实验的对照。 5．潘迪试验过于敏感，致使部分正常人亦出现极弱阳性结果，应注意正确评价实验结果。; 二、硫酸铵试验 【目的】 掌握硫酸铵试验〔罗-琼(Ross-Jonce) 试验及诺-爱（Nonne-Apelt）氏试验〕的方法。 【原理】 饱和硫酸铵溶液可以沉淀球蛋白，正常脑脊液内球蛋白含量很低，加入饱和硫酸铵后无白色反应环出现，为阴性；若球蛋白增加即可在两液交界处出现白色反应环，为阳性，此为罗—琼氏试验。除去球蛋白以后，用乙酸煮沸法测定白蛋白，为诺-爱氏试验。; 【操作】 1．加入饱和硫酸铵溶液 2．将试管内两种液体振摇混合，3分钟内再仔细观察有无浑浊或沉淀，即诺-爱氏试验Ⅰ相。 3．将上述混合液过滤，于滤液内滴入5％乙酸溶液少许，使其成为酸性，再加热煮沸，3分钟内观察有无沉淀出现为阴性，此为诺—爱氏试验Ⅱ相 。; 4．结果判断 （1）按“l”操作：3分钟内在两液交界面处出现白色浑浊环形成，为罗-琼氏试验阳性，否则为阴性。 （2）按“2” 操作：3分钟内如见有白色浑浊或沉淀为诺-爱氏试验Ⅰ相阳性，表示脑脊液内球蛋白含量增高。如仍清晰或仅显微白色，为阴性。 （3）按“3”操作：3分钟内如出现白色沉淀，为诺-爱氏试验Ⅱ相阳性，提示脑脊液内白蛋白含量增高，如加酸加热煮沸后仍然清晰，或显轻度乳白色，或微白色，都属阴性结果。 5．报告方式 ;【注意事项】 1. 硫酸铵不纯可引起假阳性。 2. 余同潘迪试验。