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还原糖及鉴定
生物组织中可溶性还原糖的鉴定实验
白糖
盐
味精
还原糖的鉴定方法
1 物理学方法:观察颜色、状态、气味;直接品尝
小苏打/NaHCO3
元明粉/Na2SO4
葡萄糖
还原糖的鉴定方法
1 物理学方法:观察颜色、状态、气味;直接品尝
2 化学方法:
斐林试剂、班氏试剂、银氨溶液等.
化学方法鉴定原理
生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)。这些还原性基团能够与试剂中的基团反应,并有明显的现象。
还原糖(葡萄糖、果糖)+菲林试剂
还原糖与菲林试剂反应过程
水浴加热
鉴定可溶性还原糖为什么要水浴加热?
用其它热源加热不易控制温度,很容易导致反应失败,而且斐林试剂里的蓝色氢氧化铜沉淀热稳定性较差,受热(80℃以上)很容易分解生成黑色的氧化铜沉淀和水,不能生成砖红色氧化亚铜沉淀。
还原糖(葡萄糖、果糖)
反应过程
2.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖 时,溶液颜色变化过程 为
A.浅蓝色 棕色 砖红色
B.无色 浅蓝色 棕色
C.砖红色 浅蓝色 棕色
D.棕色 绿色 无色
实验步骤
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
选材:含糖量较高的白色或近于白色,苹果、梨最好 。
二、实验步骤与现象
1.可溶性还原糖
制备组织样液:
制浆:去皮、切块、研磨
过滤:(用单层纱布)
取液:(2mL)
显色反应
现象:
1、为什么要选白色或近于白色的材料进行试验?
2、为什么加入组织样液与菲林试剂后溶液或显蓝色?
答:减少试验材料对试验现象的干扰,使得试验现象明显。
答:菲林试剂中的Cu(OH)2在溶液中显蓝色。
反应式
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2 →
CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
砖红色沉淀
还原糖检测实验的实验结果
三种试剂现象对比
试剂
菲林试剂
班氏试剂
银氨溶液
现象
砖红色沉淀
出现银镜
砖红色沉淀
课堂练习:
1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:
这些叶子的颜色较深,对还原性糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用
2、下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:
A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中 B.苏丹Ⅲ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D.碘化钾溶液鉴定淀粉时 ( )
A
3 还原糖与菲林试剂生成的产物是()
A CuO
B Cu2O
C Cu
D CuO2
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