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反相微胶团萃取与双水相萃取技术
第四章 反相微胶团萃取与双水相萃取技术 在水溶液中形成的胶体或微胶团,是由于表面活性剂中极性基团定向排列的结果。 在这种由于在水溶液中加入表面活性剂而形成的胶体结构中,表面活性剂的极性基团(即亲水性部分)朝外,即靠向水溶液;而非极性基团(即疏水性部分)则靠内而互相聚集成一种微胶团结构。 在反相微胶团中表面活性剂的极性基团部分围成一个极性核心,称为水池。这个水池包括表面活性剂的极性基团内表面和其中的水分,以及溶解于水中的离子等。 具有亲水性的生物大分子就可以溶解于水池中的水分而被以微胶团的形式萃取出来。将待分离组分以微胶团形式进行萃取的过程,称之为微胶团萃取或胶团萃取;如果待分离组分是以反相微胶团的形式被萃取,就称之为反向微胶团萃取或反相微胶团萃取。 反相微胶团: 表面活性剂的极性头朝内,疏水的尾部向外,中间形成极性的“核”。 反向微胶团的形成、大小及形状,与表面活性剂的种类、浓度以及操作时的温度、压力等有关。反相微胶团一般比水相微胶团要小,其分子聚集数一般都小于50。而水相微胶团的分子聚集数在50-100之间。反相微胶团中的水分含量通常用非极性溶剂中的水浓度和表面活性剂浓度之比W0来表示: W0=[H2O]/[表面活性剂] W0值越大,反相微胶团内的水分含量就越多,形成的反相微胶团的半径就越大。能溶解水溶性成分的量就越多。因此,W0大小可以反映出反相微胶团的大小和溶解能力。 表面活性剂要形成反相微胶团,在溶剂中的浓度必须达到一定值,否则就不能形成微胶团,这个形成微胶团所必需的最低浓度值,叫做表面活性剂形成微胶团的临界浓度(CMC)。 不同的表面活性剂的CMC值在0.1-1.0 mmol/L间,随温度、压力和溶剂的变化而变化。最常用的表面活性剂为丁二酸二异辛酯磺酸钠(Aerosol OT,简称AOT),分子式为: 展 望 反相微胶团技术目前仍限于实验室研究,没有商品化产品报道,而在食品科学上研究则起步更晚。主要问题有: (1) 对反相微胶团萃取的机理不清楚,尤其是酶在其中的作用机理;(2) 缺乏合适的满足食品工业需要的天然安全反相微胶团体系。 通过进一步对萃取动力学的热力学过程的认识,特别是随着新型天然安全反相微胶团体系的开发,则可在油脂水解、植物蛋白和油脂的分离、发酵滤液的提取上实现工业化生产,届时将会引起食品工业产生深刻而广泛的变革。 4. 阳离子种类对萃取率的影响 K+,Na+,Ca2+这三种阳离子对溶菌酶萃取率的影响见图所示。在0.1~0.8mol/L浓度范围内,溶菌酶的萃取率几乎不随NaCl和CaCl2浓度变化而变化,一直保持在较高状态。 阳离子种类对萃取率的影响主要体现在改变反相胶团内表面的电荷密度上。通常反相胶团中表面活性剂的极性部分不会是完全电离的,有很大一部分阳离子仍在胶团的内表面上。极性部位的电离程度愈大,反相胶团内表面的电荷密度愈大,产生的反相胶团也愈大。表面活性剂电离的程度与离子种类有关。 4. 阳离子种类对萃取率的影响 4. 阳离子种类对萃取率的影响 表为同一离子强度下的四种离子对反相胶团中W0的影响。极性部位的电荷密度按K+、Ca2+、Na+、Mg2+顺序逐渐增大,电离程度也相应地逐渐增大。? 水相为MgCl2溶液时,水相混浊,不能很好地分相,这可能是因为极性部位的电荷密度太大,以致有些AOT溶于水相,形成乳状液。水相为NaCl或CaCl2溶时,萃取率基本上不随盐浓度变化而变化,这是因为Na+和Ca2+存在时,反相微胶团内表面的电荷密度较大,以致在盐浓度较高时,胶团的大小及胶团表面间的静电引力仍足以使蛋白质能溶于反相微胶团中。 4. 阳离子种类对萃取率的影响 5. 影响的其他因素 1)有机溶剂的影响:有机溶剂的种类影响反胶束的大小,从而影响水增溶的能力,所以可以利用因溶剂作用引起的不同胶束结构实现选择性增溶生物分子的目的,如α-胰凝乳蛋白酶随溶剂的不同在反胶束中增溶的比率会出现显著的差别。 2)助表面活性剂的影响:当使用阳离子表面活性剂时,引入助表面活性
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