实验中药制片技术.pptVIP

思考 1、在完成实验、准备离开实验室前还应做哪些工作？ 2、在显微物镜低倍镜头中，哪一种最常用？水装片与水合氯醛装片粉末用量有何区别？ 3、进行粉末水合氯醛加热透化过程中，应注意哪些关键问题？显微制片最后一个环节-加盖玻片，该如何操作？ 4、显微制片中水合氯醛及稀甘油作用是什么？ 操作：以镊子自下表面夹住少许叶片，往 一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有1~2滴水的载玻片上，使其自然展 开，盖片观察。 何首乌叶下表皮组织 五、徒手制片 徒手制片的目的及材料 目的：观察组织构造、细胞特征； 材料：新鲜、干燥或经固定的材料 常用固定液——FAA固定液： 70％乙醇 90ml 福尔马林（37％~40％甲醛） 5ml 冰醋酸 5ml 取材 材料分割成适当大小，直径必须小于 盖玻片。 材料软化或冲洗 坚硬的干燥材料于稀甘油10％醋酸液中 煮至表面无气泡。 固定材料需在流水中冲洗12小时以上。 操作：取新鲜或已软化的中药材，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另外一只手持刀片，自左向右移动手腕，牵曳切片。 操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。 以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿 中浸泡。 装片 将切片以镊子夹出，置于滴加了甘油的载玻片上，加上盖玻片；或滴加水合氯醛加热透化，滴加稀甘油后加上盖玻片。 徒手切片——桑枝横切面 * * * * 实验一 显微镜的使用保养 与中药临时制片技术 一、显微镜的使用和保养 显微镜的结构 镜座 镜臂 镜筒 载物台 光路系统：目镜、物镜、集光器、光源 物镜 低倍镜：4×、10 × ——用于观察整体结构、寻找特定特征。 高倍镜：40 ×、100 ×（油镜） ——用于观察特定细微结构与组织特征， 油镜较为少用。 使用注意与技巧 先低倍后高倍，即先整体后局部 之字形扫描式寻找需要观察的特征 由低倍镜转成高倍镜后，只能使用微调 高倍镜观察时，应通过控制光源强度、 集光器高低、虹彩光阑的张合，并结合 微调，使被观察物清晰。 使用过程及使用后的保养 显微制片必须将多余的装置液清理干净， 以免沾染镜头。 如目镜与物镜被沾染，则以镜头纸从中 央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时 还要使用去污剂擦拭。 使用完毕后，移去玻片，按上述方法擦 拭，将最低倍物镜转入光路，载物台复位。 关闭电源，拔下插座，盖上防尘罩。 在相应使用登记本上签名。 二、粉末临时制片 粉末临时制片操作要领 粉末用量：米粒大小，尽可能少。 每次滴加装置液2~3滴。 每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 控制搅拌范围约为盖玻片大小。 如加热透化，则重复进行3~4次， 沸即离火，勿烧干、焦。 加盖玻片时应先一侧接触装置液，缓缓 放下，最后抽出镊子，以排除气泡。 以吸水纸吸去溢出的装置液。 稍放置后，镜检。 水装片或斯氏液装片 适用于观察淀粉粒。 装置液：蒸馏水或斯氏液（甘油醋酸）。 不可加热，否则淀粉粒糊化。 天花粉粉末——淀粉粒 水合氯醛加热透化装片 适用于除淀粉粒、菊糖以外的组织、细 胞、细胞后含物的观察。 装置液：水合氯醛（水合三氯乙醛）、 稀甘油。 需要加热。 天花粉粉末——石细胞 天花粉粉末——石细胞 天花粉粉末——具缘纹孔导管 水合氯醛或乙醇装片 适用于观察菊糖。 装置液：水合氯醛或乙醇。 不可加热，否则菊糖溶解。 党参菊糖（水合氯醛装置） 水合氯醛装置液的作用 使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其 内含物特征。 去除细胞表面或内部杂质。 增强透明度。 稀甘油装置液的作用 增加透明度。 防止气泡生成。 防止水合氯醛结晶析出。 三、整体透化装片 整体透化装片的目的与操作 目的：避免出现有些组织在粉末中破碎 或不完整而影响观察。 材料：多为叶或花。 操作：切或剪取叶或花约4mm2 ，外表朝 上，透化后观察。 装置液：水合氯醛、稀甘油。 需要加热。 金银花两种非腺毛 金银花腺毛 金银花花粉粒 四、叶表皮撕片 叶表皮撕片适用对象及操作 适用对象：观察表皮细胞、气孔、毛茸。 材料：通常为叶下表皮。 * *