微工菌种与种子扩大培养.ppt

小节： 常见工业微生物的种类和用途 生产菌种的来源与保护 控制种子质量的基本方法和手段 思考题： 在生产过程中如何控制种子质量？ * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? * 冷冻干燥步骤： 冻干样品的准备：准备菌种，与保护剂混合均匀，分装至安瓿管 预冻：2小时以上，温度达到-20℃到-35℃左右 冷冻干燥 ：8-20小时 真空封口及真空检验 ：安瓿管颈部用强火焰拉细熔封。氯化钴溶液检测真空度 低温避光保藏 ： 4℃ * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 冻干保藏特点： 冻干状态下一般可保藏5-10年不丧失活力 冻干后的菌株可常温保存，便于运输 必须使用冷冻保护剂，常用脱脂乳、蔗糖等 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 菌种保藏机构 国外： 1. ATCC American Type Culture Collection. Rockville．Maryland. U.S.A 美国标准菌种收藏所，美国，马里兰洲，罗克维尔市。 2. CSH（Cold Spring Harbor Laboratory），U.S.A 冷泉港研究室，美国。 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 3. IAM (Institute of Applied Microbiology), University of Tokyo, Japan 日本东京大学应用微生物研究所，日本东京。 4. IFO (Institute for Fermentation), Osaka, Japan 发酵研究所，日本大阪。 5. KCC (Kaken Chemical Company Ltd, Tokyo, Japan 科研化学有限公司，日本东京。 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 6. NCTC (National Collection of Type Culture), London United Kingdom， 国立标准菌种收藏所，英国伦敦。 7. NIH (National Institutes of Health), Bethesda, Maryland, U.S.A 国立卫生研究所，美国，马里兰洲，贝塞斯达。 8. NRRL (Northern Utilization Research and Development Division), U.S. Department of Agriculture, Peoria, U.S.A 美国农业部、北方开发利用研究部，美国皮奥里亚市。 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 中国，1970年7月，中国微生物菌种保藏管理委员会（CCCMS），中国科学院负责，下设六个菌种保藏管理中心。 l）CCGMC 普通微生物菌种保臧管理中心；北京、武汉 2）ACCC 农业微生物菌种保藏管理中心；北京 3）CICC 工业微生物菌种保藏管理中心；北京 4）CMCC 医学微生物菌种保藏管理中心；南京、北京 5）CACC 抗生素菌种保藏管理中心；北京、成都、石家庄 6）CVCC 兽医微生物菌种保藏管理中心；北京 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 衰退的表现：生长，代谢（产品） 衰退的原因：保藏不妥 菌种生长的要求没有得到满足 （不利环境，回复突变等） * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 防止衰退的方法： 分离复壮 合理改变培养条件 减少传代次数 诱变剂处理后重新分离单菌落 复壮：分离单细胞，抗性筛选，苛刻条件 将保存在沙土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 菌种扩培的目的 提供相当数量代谢旺盛的种子 ----量、状态的需要 得到纯、壮、多的培养物 ---- 菌种的驯化 ----缩短发酵时间、保证生产水平 * 第一章 菌种与种子扩大培养 ?#? 菌种扩培的任务 实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此将其称为实验室阶段的种子培养。 培养基：保证培养基的质量，有利于菌体的生长 减少传代次数 孢子培养时注意湿度，子斜面使用一般不超过1个月 生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工厂归发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。 培养基：控制成本，驯化；营养比发酵培养基丰富。 种子扩