十色谱及分析法概论.ppt

色谱法是一种分离分析方法 各物质在两相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，在两相中进行多次反复的分配达到分离。 流动相：气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱 固定相：气－固、气－液；液－固、液－液 第二节 色谱过程和基本原理 基线、峰高 h、半峰宽 W1/2、峰宽W 由色谱峰的流出曲线可以实现一下目的： （1）依据色谱峰的保留值进行定性分析 （2）依据色谱峰的面积或峰高进行定量分析 （3）依据色谱峰的保留值以及峰宽评价色谱柱的分离效能 （二） 保留值 保留值 （三）色谱峰高和峰面积 1. 峰高 组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离 2. 峰面积 色谱曲线与基线间包围的面积 （四）色谱峰区域宽度 1. 标准差 ? 2.半峰宽 W1/2 W1/2=2.355 ? 3.峰宽 W W = 4? （五） 分离度 三、分配系数与色谱分离 例：在1m长的填充色谱柱上，某镇静药物A及其异构体B的保留时间分别为5.80min和6.60min；峰底宽度分别为0.78min及0.82min，空气通过色谱柱需1.10min。计算：载气的平均线速度；组分B的分配比；A及B的分离度。 解： 第三节 基本类型色谱方法及其分离机制 利用被分离组分在固定相和流动相中溶解度的差别来实现分离。 溶质分子在固定相中溶解度越大，或在流动相中溶解度越小，则K越大，保留时间越长。 二、吸附色谱法 利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力差别而实现分离。 气－固、液－固 吸附过程是试样中组分分子Xm与流动相分子Yn争夺吸附剂表面活性中心的过程 2. 固定相和流动相 固定相：多为具有较大比表面积、多孔性微粒状的吸附剂 流动相：极性越强，洗脱能力越强。 三、离子交换色谱法 利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。 离子交换过程可用通式表示： 固定相：为离子交换剂，如：离子交换树脂、硅胶化学键合离子交换剂 离子交换树脂：网状立体结构的高分子多元酸或多元碱的聚合物。 性能指标：交联度、交换容量、粒度 流动相：一定pH和离子强度的缓冲溶液 溶质离子的电荷和水合半径 价态高的离子选择性系数大； 水合半径增大，离子选择性系数变小。 离子交换剂的交联度和交换容量越大，保留时间越长 流动相的组成和pH 四、空间排阻色谱法 根据被分离组分分子的线团尺寸而进行分离 又称凝胶色谱法 分离与流动相的性质无关 第四节 色谱法基本理论 色谱分离是色谱体系热力学过程和动力学过程的综合表现。 热力学过程是指与组分在体系中分配系数相关的过程，以塔板理论为代表。 动力学过程是指组分在该体系两相间扩散和传质的过程，以速率理论为代表。 一、 塔板理论（热力学） 塔板理论假定: 塔板和塔板之间不连续； 塔板之间无分子扩散； 组分在每块塔板的两相间的分配平衡瞬时达到，达到一次分配平衡所需的最小柱长称为理论塔板高度； 一个组分在每块塔板上的分配系数相同； 流动相以不连续的形式加入，即以一个一个塔板体积加入。 （一）质量分配和转移 一、质量分配和转移 例 在3.0m色谱柱上，空气、组分X和组分Y的保留时间分别为1.0、14.0、17.0min，Y的峰宽为1.0min，计算X和Y完全分离时，柱长最短为多少？ 例 已知物质A和B的分配系数K分别为6.50和6.31，已知固定相和流动相的体积比为0.422。试计算： （1）两物质的分配比; （2）选择性系数； （3）欲得到分离度为1.5时需多少塔板数？ （4）若柱长为806cm，流动相的流速为7.10cm.s-1，则需多长时间可冲洗出各物质？ 塔板理论的特点和不足 二、 速率理论（动力学） （一）影响塔板高度的动力学因素 1. 涡流扩散 A 2. 分子扩散（纵向扩散）B/u 3. 传质阻力Cu 固定相传质阻力 流动相传质阻力 （二）流动相线速度对塔板高度的影响 例 在2m长的色谱柱上，以氦为载气，测得不同载气线速下组分的保留时间tR和峰宽如下表： u（cm/s） tR（s） W（s） 11 2020 223 25 888 99 40 558 68 求： 1. Van Deemter方程中A、B、C值 2. 最佳线速uopt及最小板高Hmin 解 一、分配色谱法 1. 分离原理 固定相：途渍在惰性载体颗粒上的一薄层液体， 又称固定液。 流动相：气体或液体 流动相极性 固定相极性