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Capillary Gel Electrophoresis 毛细管凝胶电泳 CITP CZE CIEF CGE CEC Capillary Gel Electrophoresis 根据带电组分的大小分离 毛细管的表面电荷少 分离介质 交联聚丙烯酰胺 线性聚丙烯酰胺 其它可更换的水溶性聚合物 适用于淌度相近而大小不同的组分 DNA Proteins-SDS complex Synthesis of ampholyte. 分离效率可达 3千万！ HPMC浓度对给定DNA标尺混合物的分离情况。 分离介质：交联聚丙烯酰胺，线性聚丙烯酰胺，其他可替换胶。 Cross-linked Acrylamide， N,N-2 methene acrylamide T%, C% and the size of net, CGE. 5% C is special. Denature of protein by urea and mercaptoethanol to break the double S bond. Use of SDS-CGE for purity check of IgG antibody. * * Ogston Model Repatation Model CH2=CH C=O NH CH2 NH CH2=CH C=O CH2=CH CO NH2 丙烯酰胺量(a) 甲叉双丙烯酰胺(b) PA凝胶的浓度T和C T－单体和交联剂的百分浓度 C－交联剂的量 a－ 丙烯酰胺量（g） b－甲叉双丙烯酰胺的量（g） m－缓冲溶液的体积（ml） 聚丙烯酰胺凝胶毛细管柱的制备方法 检测窗口制备 内壁修饰 120°C热空气吹，室温氨气冲洗2h，后50％3－甲基丙烯酰氧丙基－三甲氧基硅烷（3－methacryloxypropyl-trimethoxysilane)充满一昼夜后，用甲醇和水冲洗 缓冲溶液制备 1.1g Tris和 0.01g EDTA溶于100 ml 7M尿素溶液，用NaH2PO4调至pH 8.6 单体溶液制备 29g 丙烯酰胺和1g N－甲叉双丙烯酰胺溶解在100ml 缓冲溶液中 催化剂制备 0.2g 过硫酸铵溶于2ml 缓冲溶液中 凝胶溶液制备 10ml 单体溶液加入到30ml缓冲溶液中，甲4ul 催化剂溶液，2.5 ul 四甲基乙二胺（TEMED）预聚合45分钟 灌注聚合 上述凝胶溶液注入毛细管到无气泡，将两端浸入缓冲溶液中聚合数小时。 亲水高分子聚合物无胶筛分体系 Mobility of dsDNA and the choice of gel concentration 凝胶的浓度－ssDNA Concentration of HPMC on the separation of dsDNA ladder A-0.1%， B-0.3%， C-0.7% 电场强度 ssDNA 高效分离 塔板数达3千万！ EB and dsDNA ssDNA Sanger 链中止法 扩增测序 HV supply Capillary Glass slide Detection window ITO thermostat PCR vial Fracture Chip PCR online with chip CE Denaturing of protein before SDS-CDenature condition: 1% SDS, 2% beta-mercaptoethanol 30min at 90?C. SDS CGE of proteins Relation of protein MW and retention time CGE用于IgG单克隆抗体纯度分析 Thymidine 胸腺嘧啶核苷，polyT, ssDNA C 5％时，不管T如何，平均孔径最小；孔径的大小有一个分布；相同T，C时，不同批次制备的胶的孔径难以完全相同。 管壁交联；加压聚合；光或放射源引发聚合等。 Sanger dideoxy chain termination method With the help of 4 color labels, CE can read the sequence directly. 葡甘露聚糖 glucomannan 方向：粘度低，筛分效果好的介质材料的合成。