第九章-其他结晶技术.pptVIP

第九章 其他结晶技术 主要内容 9.1 盐析结晶 蛋白质的盐溶与盐析现象的解释 蛋白质是亲水胶体，带有羧基解离的负电荷和氨基成盐的正电荷，其极性基团使分子间排斥，同时与水分子形成水膜。这些因素使蛋白质形成溶于水的溶胶状态。 当加入少量无机盐时，增加了蛋白质分子上的极性基团，因而增大了在水中的溶解度，出现盐溶现象。 当盐浓度到一定程度时，一方面盐同大量水分子结合，使蛋白质没有足够的水维持溶解状态，破坏了水膜，容易沉淀出来。一方面加入的离子中和了蛋白质的电荷，使相互聚集沉淀出来，出现盐析现象。 盐析现象图示 2. 蛋白质盐析原理 蛋白质在高浓度盐的溶液中，随着盐浓度的逐渐增加，由于蛋白质水化膜被破坏、溶解度下降而从溶液中沉淀出来。 各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀分离各种蛋白质。 优点：简单、经济、较少变性。 缺点：分辨率不高，要除盐。 3. 影响盐析的因素 盐析能力：半径小的高价离子在盐析时的作用较强，阴离子的盐析效果比阳离子好，尤其以高价阴离子更为明显。 PO4 3-＞SO42-＞CH3COO-＞Cl-＞NO3-＞I- NH4+＞K+＞Na+＞Li+ 盐析用盐要考虑几个因素：常用氯化钠、硫酸铵 硫酸铵优点 ⑵ 蛋白质种类的影响 不同的蛋白质分子，离子强度对蛋白质的溶解度影响的程度不同，表现为斜率的不同。 ⑶ 蛋白质浓度的影响 蛋白质浓度提高，盐用量