柞蚕微孢子虫Nosemapernyi微管蛋白基因的克隆及-应用昆虫学报.PDFVIP

应用昆虫学报ChineseJournal ofAppliedEntomology 2014,51(3):708716. DOI: 10.7679/j.issn.20951353.2014.085 柞蚕微孢子虫Nosemapernyi 微管蛋白基因的 克隆及系统发育分析* 王 勇1,2** 黄 伶2** 姜义仁 文 竹 于 峰 石生林 秦 利2 2 1 2 2*** （1. 沈阳农业大学植物保护学院 沈阳 110866；2. 沈阳农业大学生物科学技术学院 辽宁省昆虫资源工程技术研究中心 沈阳 110866） 摘 要 【目的】 柞蚕微粒子病的病原为柞蚕微孢子虫Nosemapernyi，为解明柞蚕微孢子虫微管蛋白基 因的序列信息，明确柞蚕微孢子虫的系统分类学地位。【方法】采用RT-PCR、3′RACE （Rapid mplification ofcDNAends）等技术克隆得到了柞蚕微孢子虫的α、β和γ-微管蛋白基因，并利用α、β-微管蛋白序列， 分别采用 NJ、ML 法构建进化树。 【结果】 将克隆得到的基因序列提交 NCBI （GenBank 登录 KF154086 KF023271 KF740389 号： 、 、 ）。构建的系统发育树显示，微孢子虫类以一个独立群位于真 菌群体中，与真菌的虫霉门关系较近，且与担子菌、球囊菌、壶菌、接合菌及部分子囊菌互为姐妹群。 从部分微孢子虫的系统发育分析结果可以看出，20 种微孢子虫分为2个分支，柞蚕微孢子虫与其他 Nosema 属聚为一类。 【结论】本研究克隆得到了柞蚕微孢子虫α、β和γ-微管蛋白基因，系统发育分析为 更进一步了解柞蚕微孢子虫奠定了基础。 关键词 柞蚕微孢子虫，微管蛋白基因，系统发育分析 Cloningandphylogeneticanalysisofthetubulingenesof Nosemapernyi 1,2** 2** 2 2 1,2 WANGYong HUANGLing JIANGYi-Ren WENZhu YUFeng SHISheng-Lin QINLi2 2*** (1.CollegeofPlantProtection, ShenyangAgriculturalUniversity, Shenyang 110866,China;2.CollegeofBioscience and Biotechnology, ShenyangAgriculturalUniversity,LiaoningEngineering andTechnologyResourceCenterfor InsectResource, Shenyang 110866,Chin ) Abstract [Objectives] Thepurpose ofthisprojectwasto investigatetubulin gene sequencesofNosemapernyi inorderto provide foundation for furtherphylogenetic analysis. [Methods] Using RT-PCR, 3′RACE technology, α,β and γ-tubulin genes of N. pernyi were cloned. Neighbour-Joining and Maximum Likelihood were used to construct phylogenetic tree. [Results] α, β and γ-tubulin cDNA sequences of N