HPVL1壳蛋白检测联合细胞学、HPV检测诊治宫颈病变的临床价值.docxVIP

HPV L1壳蛋白检测联合细胞学、HPV检测诊治宫颈病变的临床价值【摘要】：目的：探讨HPV L1壳蛋白检测联合细胞学检查、HPV检测在宫颈病变诊治中的临床价值。方法：收集2014年7月～2015年6月期间，在新乡医学院第一附属医院妇科门诊因体检或发现宫颈异常就诊的1052例符合入组条件的女性，进行TCT筛查、HPV分型检测,对一项或两项结果异常者进行子宫颈组织活检术，并对TCT结果异常患者采用免疫细胞化学的方法检测HPV L1壳蛋白的表达。结果：156例TCT结果异常中，意义未明确的非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌(SCC)的HR-HPV阳性率，分别为19.1%（13/68）、35.3%(18/51)、77.8%(21/27)、100%(10/10)。各组之间比较差异有统计学意义（P0.01）。TCT异常结果中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC在病理组织学CIN及以上阳性率分别为54.4%（37/68）,60.8%(31/51),85.2%(23/27),10/10。各组之间的比较，差异有统计学意义（P0.01）。随着组织病理学诊断病变级别越高，HPV L1壳蛋白阳性表达率逐渐下降。结论：TCT和HPV分型检测在宫颈癌筛查中必不可少。HPV L1壳蛋白检测可以预测宫颈癌前病变的进展趋势。三者联合应用可以及早发现宫颈癌前病变，并对病变进展风险进行合理的评估。【关键词】：人乳头瘤病毒；HPV L1壳蛋白；TCT检测；宫颈上皮内瘤变宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，人乳头瘤病毒（HPV）是宫颈癌的主要致病因子。HPV持续性感染是宫颈癌发生的必要前提。宫颈癌是由宫颈上皮内瘤变-早期浸润癌-浸润癌这个量变到质变过程发展而来。因此，早期检查发现宫颈癌前病变并早期干预可以明显降低宫颈癌的发病率和病死率。TCT和HPV分型联合检测能够有效提高宫颈病变的检出率及准确率[1]。近几年相关研究表明，HPV L1壳蛋白检测可以预测宫颈上皮内瘤变（CIN）的发展趋势[2]。本研究将薄层细胞学检查、HPV分型及HPV L1壳蛋白检测三者联合应用，将其结果对比分析，探讨其在宫颈病变诊治中的临床应用价值。1 资料与方法1.1一般资料：选取新乡医学院第一附属医院妇科门诊2014年7月-2015年6月因体检或发现宫颈异常的1052例女性患者。入选标准：怀疑宫颈癌病变者；性生活史≥3 年；排除有宫颈术史者、子宫切除者、肿瘤者、妊娠妇女和产后≤6 月者。患者年龄25～62 岁，平均（41.7±10.7）岁。1.2.研究方法：1.2.1 薄层细胞学检查：常规收集宫颈口及颈管的脱落上皮细胞送检，制作液基薄层细胞片2张。1张采用全自动超薄液基细胞学检测技术进行检测。另一张用于HPV L1壳蛋白检测。细胞学诊断采用2001年国际癌症协会(NCI)推荐的TBS分级系统进行诊断分为：正常细胞（NILN）,意义未明确的非典型鳞状上皮细胞(ASC—US)，低度鳞状上皮内病变(LSIL)，高度鳞状上皮内病变(HSIL)，鳞状细胞癌(SCC)。由两名资深病理科专家读片。1.2.2 HPV分型检测：采用深圳亚能生物技术有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型（23型）检测试剂盒，可以检测出23种HPV亚型(包括18种高危型及5种低危型)。确定能稳定检出的HPV病原体最低检测限为1.0*103copies/ml.结果按膜条上HPV 亚型分布的相应着色位点进行判读。操作步骤由检验科医师严格指导下完成。1.2.3 HPV L1壳蛋白检测：先将液基薄层细胞片放入96%乙醇中固定，然后采用美国Advance公司生产的赛泰－细胞／组织人乳头瘤病毒检测试剂盒进行检测，此检测以免疫组织／细胞化学和非同位素标记核酸分子杂交技术为基础，能识别HPV病毒28种亚型的壳蛋白。具体操作严格按公司提供的操作指南进行。HPV L1壳蛋白为核蛋白质，细胞核呈红色染色为特异性阳性染色，如出现≥1个被红染的细胞核即可诊断HPV L1 壳蛋白阳性。1.2.4 病理组织学诊断：经患者知情同意，至少1项结果异常者行子宫颈活检术。根据细胞异型性的程度和范围分为 :正常或慢性炎症、轻度不典型增生(CINⅠ)、中度不典型增生 (CINⅡ)、重度不典型增生及原位癌 (CINⅢ)、宫颈鳞癌 (SCC)。1.2.5统计学方法：对本组研究的数据采用SPSS 17.0 统计软件进行分析，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验比较，P0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 细胞学检查结果与HPV 分型比较 156例TCT结果异常患者中，其中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC的HR-HPV阳性率，分别为19.1%（13/68）、35.3%(18/51)、77.