第六章-外源目的基因表达与调控.pptVIP

第六章 外源目的基因表达与调控 生物体的遗传信息都是以核苷酸序列编码的形式储存在遗传物质DNA上, 基因表达是目的基因DNA在导入的细胞内转录成mRNA, 再以mRNA指导翻译成蛋白质。基因的表达依赖于有效的转录和mRNA的正确翻译以及翻译后的加工处理等各个环节的调节作用，其中转录最为关键，原核的基因表达过程和方式与真核细胞有显著不同。 外源基因在受体细胞中的表达包括转录和翻译两个重要环节。 基因的转录是在RNA聚合酶的作用下合成mRNA，原核生物mRNA一般不需要转录后加工。 真核生物mRNA在细胞内合成，且需要经过一繁殖加工过程：RNA剪接、5′端加帽、 3′端加上poly(A)尾巴。 原核生物一般没有翻译后加工，真核生物有较复杂的翻译后加工。 第一节 外源基因表达机制 一、外源基因的起始转录 外源基因的起始转录是基因表达的关键步骤。选择可调控的启动子和相关的调控序列，是构建一个表达系统首先要考虑的问题。 理想的可调控的启动子在细胞生长的初期不表达或低水平表达，当细胞增殖达到一定的密度后，在某种特定诱导因子的诱导下，RNA聚合酶开始启动转录，合成mRNA。 二、mRNA的延伸与稳定性 外源基因起始转录后，保持mRNA的有效延伸、终止及稳定存在是外源基因有效