试验教学检测生物组织中的还原性糖脂肪和蛋白质.docVIP

实验教学 第一单元第二章第一节 检测生物组织中的还原性糖、脂肪和蛋白质 济南中学 宋学锋 目的要求 尝试用化学试剂检测生物组织中的还原性糖、脂肪和蛋白质。 探究原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机物化合物产生特定的颜色反应。 1.可溶性还原性糖的鉴定原理 可溶性还原性糖（如葡萄糖、半乳糖、果糖、麦芽糖、乳糖等）的分子结构中含有还原性基团，碱性溶液中重金属离子、斐林试剂（甲液是质量分数为0.1g／ml的氢氧化钠和乙液为质量分数为0.05g/ml的硫酸铜溶液）或班氏试剂（柠檬酸、碳酸钠和硫酸铜）中的Cu2+是一种弱氧化剂，能使还原性糖中的还原性基团氧化，产物称为相应的有机酸，金属离子自己被还原。[试剂中的柠檬酸（或酒石酸）用作螯合剂，与Cu2+络合以防止形成氢氧化铜，而使Cu2+沉淀] 反应如下： HOC-(CHOH)n-CH2OH + 2Cu（OH）2 HOOC-(CHOH)n-CH2OH + Cu2O↓（砖红色）+ 2H2O 颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀） 说明：由于班氏试剂较稳定，且不易受其他物质的干扰，临床上常被用作尿糖（葡萄糖）的测试，药房出售的某些家庭用糖尿病自测试剂盒就是应用班氏试剂。 2.脂肪的鉴定原理 苏丹Ⅲ染液遇脂肪为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪为红色，以此来鉴定生物组织中脂肪的存在，这是把化学反应和显微镜结合起来，这种方法称为显微