第3章：肝炎检测系列.docVIP

病毒性肝炎 病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的,以肝脏炎症和坏死病变为主的一组传染病.。主要通过粪口、血液和体液而传播。临床以疲乏、食欲减退、肝肿大、肝功能异常为主要表现。部分病例出现黄疸，无症状感染常见。因其病原不同而分为甲、乙、丙、丁、戊、己和庚七型。 甲肝（HAV）的实验室诊断 1、抗—HAV IgM检测 常用捕捉夹心ELISA法检测。该抗体的检出具有确诊意义，一般在临床症状出现后，患者血清中抗—HAV IgM阳性，1~~~3个星期达高峰，1~~~2个月内含量下降，1~~~3个月左右转阴，故抗—HAV IgM阳性，尤其滴度较高（＞1000）时，常表明为急性HAV感染或复发。 2、抗—HAV IgG 抗—HAV IgG较抗—HAV IgM晚一周，可持续数年或终生。 乙型肝炎（HBV）的实验诊断 HbsAg HbsAg多用固相放射免疫分析和ELISA检测。HbsAg是乙肝最先出现的病理标志物，在急性肝炎的潜伏期即可出现阳性，其检测结果有助于乙肝的诊断，据此采取及时措施，对减少输血后肝炎、控制乙肝的母婴传播有经济意义。 抗—HBs 抗—HBs方法同HbsAg的检测，其阳性显示机体曾受乙肝病毒感染并产生相应的抗体，抗—HBs对HBV的侵袭具有免疫力，被认为是保护性抗体。 HbeAg HbeAg采用双抗体夹心ELISA法检测。它是乙肝传染性的标志，检测其有助于HbeAg携带者传染性强弱，母婴传播的危险率及急性乙肝的预后等。 抗—Hbe 为HbeAg刺激机体产生的非保护性抗体。HbeAg消失和抗—Hbe的出现显示乙肝病情的好转，但不能作为无传染性的指标，也不一定是对机体有益的标志（甲胎蛋白与之有相关性）。当HbeAg阳性同时出现了抗—Hbe，大部分患者生化指标趋于正常，临床病情稳定。但此时多有HBV DNA与肝细胞的整合，病理进程并未停止。因此临床上由于HBV感染所致的肝硬化和肝癌患者，有较高的HbeAg和抗—Hbe同时存在的阳性率。 抗—HBc 抗—HBc用竞争ELISA法检测。高滴度的抗—HBc阳性表明肝内HBV在复制，低滴度则示既往感染。几乎所有的个体在感染HBV后总能产生抗—HBc，因此它是流行病学调查的良好指标。 HbcAg HbcAg存在证明HBV感染。 抗—HCV 抗—HCV检测用ELISA方法，而HCV—RNA须以RT—PCR检测。 大多数感染有HCV的患者，体内均出现抗—HCV，但由于其出现较慢，一般在发病后2~~6个月才为阳性，有的在第12个月才出现，故阴性不能发现早期患者，且少数患者为一过性HCV感染，抗HCV始终阴性，所以一次阴性并不能排除HCV的诊断。抗—HCV检测在献血员的筛选中能排除85%具有HCV传染性者，因此对预防丙肝具有重要意义。 若HCV—RNA和抗—HCV同时阳性为活动性HCV感染，反之前者阴性而后者阳性是既往感染。 抗—HDV和抗—HDV IgM检测 一般运用竞争ELISA法检测抗—HDV，而以捕捉夹心ELISA法检测抗HDVlgM。患者只有在感染了HBV后，才会感染HDV，因此临床上常见为乙肝与丁肝病毒同时感染或重叠感染。在这些患者血清中有HbsAg等乙肝学标志物，故检测HbeAg、抗—Hbe和HBs可提示丁肝的预后。 抗—HDV检测代表总抗体，可借以诊断感染，尤其是高滴度抗—HDV可确诊为慢性HDV感染。 抗—HDV lgM的检测有助于早期诊断，表示急性或新近感染HDV，慢性活动期也可阳性，但效价较低。 抗—HEV检测 用间接ELISA法检测。阳性者为感染的证据，其阴性结果并不能排除患者对HEV暴露过。 庚型肝炎的检测 抗-HGV为感染的证据。 HBV拉米夫定耐药检测临床意义 项目名称：HBV拉米夫定耐药检测 二、检测方法：荧光PCR 三、概述： 拉米夫定（Lamivudine，3TC）全称是2`，3`-双脱氧-3`-硫胞嘧啶核苷（（1）-β-L-2`，3`-deoxy-3`-thiacytidine），是一种核苷类似物，拉米夫定被吸收后在细胞内磷酸化，形成拉米夫定（3TC）的5`三磷酸盐（3TC-TP），主要为抑制病毒复制时必需的逆转录酶活性。目前认为抑制病毒复制的机制可能有三种：3TC-TP与磷酸脱氧胞嘧啶核苷（dCTP）竞争HBV和HCV等多聚酶的三磷酸核苷结合部位；（2）3TC-TP导致HBV和HCV等反转录酶、多聚酶的不可逆性及剂量依赖性抑制；3TC-TP竞争性掺入延伸的DNA，因它缺乏3`羟基而使复制的病毒DNA链终止。3TC仅抑制病毒 DNA的复制量及其复制中间体的产量，而对病毒 RNA、病毒抗原和已形成的共价闭环、超螺旋结构的病毒 DNA无作用。HBV及其抗原自肝细胞内的彻底清除，要靠机体自身的特异性免疫清除及病毒抗原的自然半衰期。作为新一代核