苯并[a]芘对马氏珠母贝血淋巴细胞DNA损伤的研究.pdfVIP

生态环境学报 2011，20(6-7)：1107—1110 http：／／www．jeesci．com EcologyandEnvironmentalSciences E-mail：editor@jeesci．com 苯并[a】芘对马氏珠母贝血淋巴细胞DNA损伤的研究 张先勇 ，刁晓平L，杨宝 ，周海龙L乙。，曹佳 1．海南大学农学院，海南 海VI570228；2．海南省热带生物资源可持续利用重点实验室，海南 海口570228； 3．海南大学热带水生生物技术重点实验室，海南 海 口570228 摘要：通过单细胞凝胶电泳技术 (彗星试验)研究了苯并[a]芘 (B[a]P)对马氏珠母贝 (Pinctadamartensi)血淋巴细胞DNA 的损伤。结果显示，在相同暴露时间内，不同质量浓度的B[a]P均能引起马氏珠母贝血淋巴细胞DNA损伤。4IxgL·B[alP处理 组DNA含量、彗尾长度和Olive尾矩均最大，分别为34．39％、281．73和60．31gm。随着暴露时间的延长，彗星尾长明显增加， 表现出明显的时间．效应关系 ，而DNA含量和Olive尾矩没有呈现出规律性变化。此外，在不同的染毒时间内，对照组和各处 理组之间均存在显著差异 (P0．05)，at指标具有很好的一致性。研究表明，彗星试验是检测B[a]P对马氏珠母贝血淋巴细胞 DNA损伤的一种有效手段，马氏珠母贝血淋巴细胞DNA损伤可作为指示B[a]P污染的一种有效生物标志物用于早期预警监测。 关键词 ：马氏珠母贝；苯并[a]芘 ；血淋巴细胞；DNA损伤 中图分类号 ：X171．5 文献标志码：A 文章编号 ：1674．5906(2011)06．07．1107．04 苯并[a]芘 (benzo[a]pyrene，B[a】P)是海洋环境 贝DNA损伤鲜有报道。本研究以B[a]P为受试物 ， 中广泛存在 的种 多环 芳烃 (polycyclicaromatic 选用马氏珠母贝作为实验材料，采用单细胞凝胶电 hydrocarbons，PAils)，经生物代谢后具有致畸、致 泳(SCGE)检测B[a]P对其血淋巴细胞DNA损伤的情 癌和致突变作用…。由于B[a]P具有脂溶性特征，容 况，为B[a]P对海洋无脊椎动物生态毒性效应及其遗 易进入水体中，并蓄积在水生动物体内，从而对水 传毒理机制的研究提供了科学依据。 生动物造成持久性的影响。近年来 ，国内外有很多 1 材料与方法 学者研究，利用较为敏感的生物标志物来监测和评 1．1 实验仪器 价微量有机污染物的毒理效应。 AY220型 电子天平 (日本Shimadzu公司 )； 彗星实验 (cometassay)，又称单细胞凝胶电 MilliQ型纯水仪 (美国Millipore公司)；HH．$26s型 泳 (singlecellgelelectrophoresis，SCGE)，被认为 电热恒温水浴锅 (金坛市大地 自动化仪器厂 )； 是一种简便、快速、敏感性高的DNA损伤与修复 CR22GII型冷冻离心机 (日本Hitachi公司)；荧光 的检测技术2【]。能检测包括 DNA 单链断裂、双链 显微镜El本(OlympusIX71)；DYY-7C型电泳仪(北 断裂、碱不稳定位点、DNA—DNA交联、DNA．蛋白 京六一仪器厂 )；可调微量加样器。 交联和 DNA单链断裂伴不完全切割修复位点等多 1．2 实验试剂 种 DNA 损伤 3【J。是一种进行环境监测、流行病学 B[a]P(购于美国sigma公司)；台盼蓝，正常熔 调查以及生态毒理学研究的有效工具，在贝类方面 点琼脂糖 (oxodi)，低熔点琼脂糖 (promega)；十 已开展了相关研究，Frenzilli等L4J利用彗星实验研究 二烷基肌氨酸钠 ，Na2EDTA，Triton一100，Tris， 了不 同盐度 的海水对 地 中海 贻 贝 (M