FSH和LH对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响.pdfVIP

and 2009年第45卷第11期 羹疆生理·ReproductionPhysiology 及重组胚发育的影响 胡艳明，祖 晶，孙焕林，吴 昊，李钟淑，方南洙。 (延边大学农学院动物遗传育种与繁殖实验室，吉林龙井133400) 摘要：实验主要研究促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响，从而 提高延边黄牛体细胞克隆的效率。采集屠宰后延边黄牛卵巢，用抽吸法回收卵母细胞，然后在不同种类、浓度激素 条件下进行卵母细胞的体外成熟培养，最后将成熟的卵母细胞进行核移植及重组胚的体外培养。实验分别比较了 在0、5、10、15、20 p,g／mL条件下，单独使用FSH与LH和在15斗g／mL的FSH与10Ixg／mL的LH共同作用下 对延边黄牛卵母细胞体外成熟率、卵裂率和囊胚发育率的影响。结果表明：将卵母细胞单独置于加有浓度为 15 2种最优浓度同时添加共同作用时要好于单独使用(P0．05)。由试验可得出，成熟培养液中单独添加 15¨g／mL的FSH和单独添加10Ixg／mL的LH浓度对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚后期发育效果最好； 使用最佳浓度进行协同作用时，其共同作用要好于单独使用的效果。 关键词：FSH；LH；卵母细胞；体外成熟；延边黄牛 中图分类号：$823．3 文献标识码：B vitro 卵母细胞核的成熟【3】。除了核成熟外，卵母细胞的胞 EdwardsI-1获得牛卵母细胞的体外成熟(in 质成熟也很重要，尤其是对用于核移植的卵母细胞 maturation，IVM)培养的成功。Brackett等121人首次报 道用手术法收集牛卵母细胞进行体外受精，并产下 而言，胞质的成熟直接关系到能否使供体核实现彻 活犊的试验。其后相继报道了卵母细胞的体外培 底的再程序化、重构胚，能否维持正常的分裂发育 养、受精、移植和妊娠，产下活犊的试验结果。卵母 【4】。从这个意义上说，目前所用的卵母细胞成熟体系 细胞的成熟是一个复杂的、动态的过程，有许多代谢 还不尽完善，一些对卵母细胞成熟和后续发育非常 事件发生，除了进行积极的mRNAs转录、蛋白质合重要的物质不能完全合成。卵母细胞的成熟受到多 成外，还有其他一些物质的降解。从卵巢中采集到 种因素的影响，其中激素对卵母细胞的成熟起着重 的卵母细胞，外面有多层卵丘细胞包围，故称为卵丘 要的作用。 一卵母细胞复合体(cumulus—oocyte FSH或LH是成熟培养液中使用较多的促性腺 complex，COC)， 此时的卵母细胞不能用于受精。卵丘细胞、透明带、 激素，FSH与颗粒细胞表面的受体结合，分泌雌二 卵质和细胞核发生一系列连续性的结构和分子方面 醇，并诱导卵泡膜上黄体生成素(LH)受体的生成， 的变化，完成核成熟和胞质成熟。未成熟的卵母细 滤泡细胞表面FSH受体数目增加，随着雌二醇浓度 胞核在细胞中央，在成熟过程中逐渐迁到动物极质 的不断升高而分泌另一种激素LH，在LH的作用 膜下，核变得膨大改称生发泡，接着进行第1次成熟 下，卵母细胞开始恢复减数分裂，核膜破裂，染色体 分裂。在动物极附近排出第一极体，使卵母细胞核 凝聚，直到完成第1次减数分裂，而导致卵母细胞被 处于第2成熟分裂的中期。减数分裂的完成标志着 排出卵巢。从上述情况可以看出卵母细胞成熟的过 程FSH、LH、雌二醇起到了启动和促进卵母卵细胞 收稿口|胡：2008--09—28；修回日期：2009-03-．08 成熟的作用。故在