生物化学习题-第十、十一章：DNA及RNA的生物合成.pdfVIP

第十、十一章 DNA 与 RNA 的生物合成 一、知识要点 在细胞分裂过程中通过 DNA 的复制把遗传信息由亲代传递给子代，在子代的个体发育 过程中遗传信息由 DNA 传递到 RNA ，最后翻译成特异的蛋白质；在 RNA 病毒中 RNA 具 有自我复制的能力，并同时作为 mRNA ，指导病毒蛋白质的生物合成；在致癌RNA 病毒中， RNA 还以逆转录的方式将遗传信息传递给 DNA 分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 复制是指以原来 DNA 分子为模板，合成出相同 DNA 分子的过程；转录是在 DNA （或 RNA ）分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA （或DNA ）的过程；翻译是在以rRNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白体上，以 mRNA 为模板，根据每三个相邻核苷酸决定一种氨基 酸的三联体密码规则，由 tRNA 运送氨基酸，合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过 程。 （一）DNA的生物合成 在DNA复制时，亲代DNA 的双螺旋先行解旋和分开，然后以每条链为模板，按照碱基 配对原则，在这两条链上各形成一条互补链，这样从亲代DNA 的分子可以精确地复制成 2 个子代DNA分子。每个子代DNA分子中，有一条链是从亲代DNA来的，另一条则是新形成 14 15 的，这叫做半保留复制。通过 N和 N标记大肠杆菌实验证实了半保留复制。 1．复制的起始点与方向 DNA 分子复制时，在亲代分子一个特定区域内双链打开，随之以两股链为模板复制生 成两个子代 DNA 双链分子。开始时复制起始点呈现一叉形（或 Y 形），称之为复制叉。DNA 复制要从 DNA 分子的特定部位开始，此特定部位称为复制起始点（origin of replication ）， 可以用 ori 表示。在原核生物中复制起始点常位于染色体的一个特定部位，即只有一个起始 点。真核生物的染色体是在几个特定部位上进行 DNA 复制的，有多个复制起始点。酵母基 因组与真核生物基因组相同，具有多个复制起始点。 复制的方向可以有三种不同的机制。其一是从两个起始点开始，各以相反的单一方向 生长出一条新链，形成两个复制叉。其二是从一个起始点开始，以同一方向生长出两条链， 形成一个复制叉。其三是从一个起始点开始，沿两个相反的方向各生长出两条链，形成两个 复制叉。 2．DNA 聚合反应有关的酶及相关蛋白因子 DNA 的合成是以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物的聚合反应，该过程除了需要酶的催 化之外，还需要适量的 DNA 为模板，RNA （或DNA ）作为引物和镁离子的参与。催化这 个反应的酶也有多种：DNA 聚合酶、RNA 引物合成酶（即引发酶）、DNA 连接酶、拓扑异 构酶、解螺旋酶，此外还需要多种蛋白质因子参与。 3．DNA 的复制过程 DNA 的复制按一定的规律进行，双螺旋的 DNA 是边解开原有的螺旋边合成新链的。 复制从特定位点开始，可以单向或双向进行，但是以双向复制为主。由于 DNA 双链合成的 延伸方向均为 5 ′→3 ′，因此复制是以半不连续的方式进行，即其中一条链相对地连续合 成，称为前导链，另一条链的合成是不连续的，称为后随链（或滞后链）。在 DNA 复制叉 上进行的基本活动包括：双链的解开、RNA 引物的合成、DNA 链的延长、RNA 引物的切 除，缺口的填补，相邻 DNA 片段的连接。 （二）逆向转录 在逆转录酶作用下，以RNA为模板，按照RNA 中的核苷酸顺序合成DNA ，这与通常转 录过程中遗传信息流从DNA到RNA 的方向相反，故称为逆向转录。逆转录酶需要以RNA （或 DNA ）为模板，以四种dNTP为原料，要求短链RNA （或DNA ）作为引物，此外还需要适当 浓度的二价阳离子Mg2+和Mn2+ ，沿 5 ′→3 ′方向合成DNA ，形成RNA-DNA杂交分子（或 DNA双链分子）。逆转录酶是一种多功能酶，它除了具有以RNA为模板的DNA聚合酶和以 DNA为模板的DNA聚合酶活性外还兼有RNaseH 、DNA 内切酶、DNA拓扑异构酶、DNA解 链酶和tRNA结合酶的活性。 几乎所有真核生物的 mRNA 分子的 3 ′末端都有一段多聚腺苷酸。当加入寡聚dT 作引 物时，mRNA 就可以成为逆转录酶的模板