线虫磷酸化蛋白质组学的系统分析.pdfVIP

摘要 确定磷酸化蛋白质的修饰位点是磷酸化蛋白质组学研究的首要任务和关键 步骤。蛋白质组学是研究一种生物体或一种器官、细胞器中全部蛋白质的性质、 含量、结构及其生理生化功能变化的学科，以生物体全部蛋白及其活动规律为研 究对象，它将是后基因组时代生命科学研究的核心内容。而磷酸化修饰是生物体 内最重要的蛋白质翻译后修饰之一，蛋白质的可逆磷酸化过程是真核细胞生命活 动最普遍的调控手段。磷酸化修饰如此重要，但是因为磷酸化修饰是一种动态过 程，而且发生这种翻译后修饰的蛋白占总蛋白的比例非常低，给蛋白磷酸化的研 究造成了难题。 蛋白质组学的核心技术是有机质谱技术，该项技术随着科技的发展正迅速发 展壮大。电喷雾电离（Electrospray Ionization，ESI）这种软电离技术的发明， 解决了生物大分子分析中的高分子量、热不稳定性、难带电荷离子化、难汽化的 重要难题，为推动蛋白质组学的发展又做出重要贡献。串联质谱（MS/MS）技术 将多级质谱串联使用，此过程中对带电离子的多次选择又提高了质谱分析的灵敏 度、精确度和准确性。 为了系统地在整体水平上研究线虫的磷酸化蛋白质组学，我们以线虫作为实 验动物，获得较大量的蛋白样品；运用了分子排阻色谱和强阳离子柱