质粒提取和酶切图谱鉴定.pdfVIP

m．42呻5 ·253 黑龙江医药№iI∞西iallgⅣⅢc址J0ⅢTlal、D1．18 质粒提取及酶切图谱鉴定 李潇王明强王滨友 哈药集团制药总厂(150086) 摘要本实验是采取碱变性方法从重组大肠杆菌中提取质粒DNA，井用E。承I，B町州I两种限制性内切酶 对质粒Ⅸ峨进行适当酶切，然后进行琼脂糖凝胶电泳对DNA酶切图谱加以鉴定。通过在紫外灯下观察电泳结果，证 实利用碱变性方法提取质粒，同时通过酚氟仿抽提，得到的质粒DNA纯度比较高。并且证实酶切图谱与预计相符。 从而说明在一般工厂的实验条件下可以进行操作。 关键词碱变性；质粒；限制性内切酶；琼脂糖凝胶电泳 DistillPlasmidandDeterminationofREP Uxiao．ef口f． m，6mGenemf P砌，m．劢c￡o，yD，m而加砌口Mnce州cⅡf re阳曲ine∞lifo肌Andit Abstr舵t1he pl删“DNA”fr。m experjIr蛐t却山e、张yof妇nI血】g们djstill ofr吲IictioIldld叩ucle唧．111en proo啪珊wlydi辨s呛forp1缸nidsⅨ吨AⅧ小“E∞RI”，“B町HI”咖kiI】d ap_ adk曲lofiUus咖dve carl0b9erveaSa晒L11t0fdle pla船i11dea∞phor商5 pmise of霹l∞e斟for“D卜渔”It口．we of“travjolet船diadon．h dleSarnetⅡne elech啦re出widll锄_lp valida地廿忙w8y幻I】sed印atLl打r】g切disdUpla鲫[1il矗．At a∞【k血n0f case缸删0f 幻di茆l埘1印d—d曲rof哪．f妇Uy幻getverypurep1疆rljds“DNA”．It粼∞rnatch iULlsⅡavdve f≤口．S0it矗Ⅱ删吐lat、Ⅳecan plat曙a1)out pe—omlan∞中er证瑚t∞址nccⅡm埘dyn加ufac∞ry． words Ke，r d日lanlrirlg dec廿。l小ores遮 pl越mi出；Ies口iclion口幽ucl朗s曙；gelosegd 随着现代分子生物学的快速发展，分子生物学实验技术 氯化钠59 迅速渗透到生命科学的各个领域，特别是医药学。肼蛆重组 缸虮Na旺I调节州至7．0 技术应用越来越广泛．定向地改造生物或者其功能，改良品 15磅高压下蒸汽灭菌20分钟 种，甚至创造新物种。并且利用微生物生长旺、繁殖快的特 1．3试剂