石仙桃多糖的提取工艺和纯化的研究.pdf

石仙桃多糖的提取工艺及纯化的研究 杨海花，翁寒梅，管永光，林燕，甘纯玑 福建农林大学食品科学学院，福州（350002 ） E-mail ：yanghaihua198167@ 4 摘 要：采用单因子试验和L (3 )正交试验设计, 研究了料液比、提取时间、提取温度对石 9 仙桃多糖提取率的影响，筛选出了最佳提取工艺。采用盐析除法蛋白，乙醇反复沉淀的方法 纯化石仙桃多糖。结果表明, 影响多糖提取率的主次因素为提取时间、料液比及提取温度; 石 仙桃多糖最佳提取工艺条件为: 提取温度为80℃,浸提时间为5h ,料液比为1 ∶40。在此最佳工 艺条件下, 石仙桃多糖的得率为2.25 ％。纯化后的多糖经纯度鉴定为均多糖。 关键词：多糖；石仙桃；提取；纯化 0 引言 石仙桃（Pholidota chinensis Lindl ）为兰科石仙桃属植物石仙桃的假鳞茎或全草，又名 石上莲、石橄榄、石穿盘、石萸肉等[1] 。其水提物具有养阴、清肺、利湿、消瘀的功能，可 治疗眩晕、头痛、咳嗽、吐血、梦遗、痢疾、白带、疳积，民间常用来治疗高血压、头晕及 其他原因引起的头痛[1,2] 。临床研究证实，石仙桃水提物可治疗眩晕、轻度脑震荡等病症， 用石仙桃提取物制成的头痛定糖浆可治疗神经性头痛，总有效率达 90%，疗效显著[3] 。但迄 今为止，有关石仙桃水提物有效成分的深入研究却鲜有报道。 石仙桃多糖是石仙桃水提物的主要成分之一，本文采用单因子试验和L 4 9 (3 ) 正交试验 设计,对石仙桃多糖的提取工艺进行了研究，并对多糖进行了纯化，为后续相关研究工作提 供依据。 1 材料与方法 1.1 材料及仪器 供试植物：石仙桃，2006 年 10 月采自福建山区。 仪器：电热恒温水浴锅(BC-W201,上海贝凯生物化工设备有限公司) 、乌氏黏度计、分 光光度计（VIS-7220,北京瑞利分析仪器有限公司）、电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9070A,上 海益恒实验仪器有限公司）、循环水真空泵（SHB-Ⅲ,郑州长城科贸有限公司）、旋转蒸发仪 （RE-5258A,上海亚荣生化仪器厂生产）、离心机(5804R ,Eppendorf)、真空冷冻干燥机(LGJ1.5, 北京四环科学仪器厂) 、高效液相色谱仪(Waters2695 ，Waters 公司) 、智能型红外光谱仪 (Nicolet360，美国尼高力) 。 试剂：硫酸锌、亚铁氰化钾等均为分析纯。 1.2 方法 1.2.1 石仙桃粗多糖的提取 新鲜石仙桃鳞茎→清洗→冷冻干燥→粉碎→热水提取→抽滤→浓缩→乙醇沉淀→沉淀 用无水乙醇、丙酮和乙醚洗数次→石仙桃粗多糖。 - 1 - 1.2.2 石仙桃粗多糖提取工艺的优化 在单因素试验的基础上，采用 L 4 9(3 )正交试验设计，进行三因素三水平试验，研究多糖 提取的较佳工艺参数。设计正交因素水平如下： 表 1 正交因素水平表 Tab.1 The orthogonal table of factors and levels 水平 料液比 温度/ ℃ 时间/h A B C 1