[成都七中生物奥赛培训生化]第11篇 基因工程.pdf

第 十 一 章 基因重组和基因工程 Genetic Recombination and Genetic Engineering Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 第 一 节 细胞内的DNA重组 DNA Recombination Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 DNA重组 同源重组(homologous recombination) 接合作用(conjugation) 转化作用(transformation) 转导作用(transduction) 位点特异的重组(site-specific recombination) 转座(transposition) Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 一、同源重组 发生在同源序列间的重组称为同源重组 (homologous recombination)，又称基本重组。 是最基本的DNA重组方式，通过链的断裂和 再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单 链或双链片段的交换。 以E.coli的同源重组为例，了解同源重组 机制的Holliday模型。 Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 Holliday模型中，同源重组主要4个关键步骤 ①两个同源染色体DNA排列整齐 ②一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA 对应的链连接，形成Holliday中间体 ③通过分支移动产生异源双链DNA ④Holliday中间体切开并修复，形成两个双链 重组体DNA，分别为： 片段重组体(patch recombinant) 拼接重组体(splice recombinant) Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 片段重组体（见模型图右边产物）： 切开的链与原来断裂的是同一条链，重组 体含有一段异源双链区，其两侧来自同一亲本 DNA。 拼接重组体（见模型图左边产物）： 切开的链并非原来断裂的链，重组体异源 双链区的两侧来自不同亲本DNA。 Dr.Qiang Fu. Dept.of Biochemistry Molecular Biology, Preclinical Medicine School, SCU, 2014. 12 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 内切酶 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 3´ (recBCD) 5´ 3´