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- 2017-10-08 发布于广东
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基因工程的基本操作程序1.
2、将目的基因导入动物细胞 ①方法:显微注射法 ②程序: 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测:是否插入、转录、翻译 鉴定: (2)基因枪法 (3)花粉管通道法 目的基因表达载体提纯 取卵(受精卵) 显微注射 受精卵 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法: 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 (一)、检测 1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 ①.首先取出转基因生物的基因组DNA ②.用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针 ③.使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中 (1)方法: DNA分子杂交 (2)过程: 归纳步骤 DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段,将两种生物的DNA分子
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