氧化亚铁硫杆菌耐铀氟离子的连续转接驯化和联合驯化.pdfVIP

第 11 卷第5 期 过 程 工 程 学 报 Vol.11 No.5 2011 年 10 月 The Chinese Journal of Process Engineering Oct. 2011 氧化亚铁硫杆菌耐铀氟离子的连续转接驯化和联合驯化 王永东， 丁德馨， 李广悦， 胡 南 (南华大学铀矿冶生物技术国防重点学科实验室，湖南 衡阳 421001) 摘 要：为了提高氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans , A.f) 的驯化效率，获得能耐受高浓度铀和氟离子的A.f 菌株，对分离纯化得到的A.f 菌株 SKS10 的耐铀、耐氟驯化方法进行了研究，提出了连续转接驯化和联合驯化方法. 结 6+ 果表明，连续转接驯化法可加快驯化速度，提高驯化效果，96 h 可获得氧化速率提高 7.5 倍、能耐受 1000 mg/L U 6+ − 的菌株，且能获得用传统驯化方法不能得到的耐受 1500 mg/L U 的菌株及能耐受 120 mg/L F 的菌株. 与传统驯化法 相比，联合驯化法可获得能同时耐受较高铀和氟离子且氧化活性较强的菌株，先进行耐铀驯化再进行耐氟驯化效果更 6+ − 2+ 好，在含 1000 mg/L U 和 80 mg/L F 的培养基中，Fe 的氧化速率是其他驯化方法的 6 倍以上. 关键词：氧化亚铁硫杆菌；驯化；铀；氟 中图分类号：TD853.37 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2011)05−0834−06 1 前 言 但在 280 mg/L F−的培养基中不能生长；而驯化后只需 氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans , A.f) 要 3 d 就能将含 280 mg/L F−的培养基中的Fe2+完全氧 是常用的浸矿细菌之一，目前在铀、铜、金等浸出中得 化，最终获得能耐受 850 mg/L F−的菌株，在该浓度下， 到了广泛应用[1−3]. 但从自然界中分离、纯化得到的 A.f 将 Fe2+完全氧化需 14 d. Soumitro 等[10]逐步加大初始 菌株普遍存在环境适应能力差的问题，尤其是铀和氟对 Fe2+浓度进行A.f 驯化培养，当初始Fe2+浓度约为 25 g/L 其生长有明显的抑制作用，20 mg/L F−就能对其产生严 时，经反复多次接种培养 Fe2+氧化速率才能基本稳定. 重的毒害作用，使其生长受到抑制[4] ，而 1 g/L 铀离子 这种方法目的性较好，但只考虑单因素的影响，且驯化 能使A.f 的休眠时间延长至4 d[5]. 本实验室从某铀矿山 用菌种均为野生菌，当毒性因子浓度较高时，需较长时 矿坑水中分离得到的一株 A.f ，只能耐受 1100 mg/L 铀 间才能适应，且需转接数次才能达到较好的驯化效果， 或 50 mg/L 氟，且 Fe2+氧化率分别仅为 5.27 和 18.43 以致驯化所需时间较长. mg/(L⋅h) ，因此，需对其进行驯化以提高其耐受能力， 针对目前A.f 驯化中遇到的上述问题，本研究以A.f 才具有实用价值.