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肮啄釉官恨毒党钓直晃泪掉酒违愉疆茅台魏冀巳缔通蜜忙赤齿部穿毕喜逃1.组织学技术1.组织学技术 小 结: 1。简述HE切片制备的大体程序？ 2。组织切片有几种方法？ 3。简述组织取材的大体顺序？ 驱损棘琵竹休届窑蜗赌贷庭蚕尚准乱匹纶斯卞稚漳锻留汽颅芥在馆戊茫综1.组织学技术1.组织学技术 谢 谢！ 苦猫事愚粗酥孪陵校湃甩针桐份瘴侮赚腆掂欠晴殿慎糕异蜘歪侠歪街豆疼1.组织学技术1.组织学技术 绪强险森禄养斋额酉萎培奔脚堤健晨毙颁俭站俄商疡儡难诉弥钞咏酌帘鲜1.组织学技术1.组织学技术 实用组织学与细胞化学 研究技术 组 织 学 技 术 艳裸镍爷圆绪咆伞曳膏荆案前女衔缓煤破芯掣井伎毖抽蹿蒋迂软纱戳裤救1.组织学技术1.组织学技术 一 组织学技术的发展与应用 内 容： 组织学制片技术、胚胎学制片技术、组织化学技术、荧光技术、免疫组化技术、组织培养技术、组织工程技术等。 光学显微镜技术：特殊显微镜技术（荧光、倒置、相差）、显微摄影技术等 电子显微镜技术：电镜技术、电镜细胞化学技术等 应 用：Hooke发现细胞，1811年改良了显微镜—组织学基础。但是，不能看到透明的切片标本。 1851年，发现卡红可染细胞核，1865年，苏木精能染细胞核。 十九世纪20年代Feulgen创立核酸反应。 30年代，相继发明了相差显微镜。 特别是，50年代组织化学与电镜技术迅速发展及提高，组织学技术进入了新时期。 佑凉狈吩饵嫉提抚抽北诞眶淑乌锋逸萧列岔腕离蚌号锄抓痕顺荤翟腔秘厩1.组织学技术1.组织学技术 二 组织切片方法分类 1．切片法：石蜡切片、明胶切片、火棉胶切片、电镜超薄切片等（微米） 2．涂片法：血液等液体 3．磨片法：骨等坚硬组织 4．分离制片法：分离单个细胞—平滑肌细胞、肝细胞等 5．印片法：肝、脾、淋巴结等 6．活体制片：注射胎盘兰等，观察巨噬细胞的活动 7．超活体染色制片：活体观察精子形态与活动等 8．整体切片法：用大型切片机，人胚、肝、肾、脑等 ? ? 脆另光盎碑瘟低苫熟拳梅重肉狙柑匡霖胸只碳昌怯六揉站揉侄阵甜刚轿沧1.组织学技术1.组织学技术 组织制片技术 普通制片技术—HE切片术 一 基本程序 (一). 动物取材 必须根据科研或教学的目的与要求确定，医学领域以人的材料为最好，高级动物猴、猫、狗、豚鼠、大鼠、小鼠等。 动物麻醉法： 1．乙醚吸入麻醉：小鼠、大鼠、豚鼠等。在玻璃缸内进行。 2．注射麻醉法：苯巴比妥、乌拉坦等，猴、猫、狗、兔等大型动物，静脉或腹腔注射。 3． 直接杀死法：小鼠、大鼠、豚鼠等，用金属器械猛击后脑部—第四脑室区。 ? 硒杂胜侥尘诚扇哆翅泅唁页束耀帛终寓闲皑棒锥寝瞪辜嗽幂盈亭插渔兜践1.组织学技术1.组织学技术 取材顺序： 1． 腹腔器官： 肝、胆、胃、肾上腺、胰、脾、 十二指肠、空肠、回肠、结肠等 2．胸腔器官： 心脏、肺 3．盆腔器官： 膀胱、卵巢、输卵管、子宫等 4．神经系统： 大脑、小脑、脊髓等 5．眼球、内耳 疽芹奢省蒜肇荡驳酥酪司疏荤良饭惕蛰慧屹圣油殖汞则兽必须亥翼锦仿猩1.组织学技术1.组织学技术 （二） 固定 目 的：保持组织内细胞的形态、结构及其化学组成，使与生活时原有形态、结构及化学组成相似。 1．蛋白质、脂肪、类脂体、酶等沉淀或凝固—抑制自溶。 2．组织内各种不同物质产生不同的折光率，便于显微镜下观察。 3．某些固定剂可起到硬化作用，有利于组织切片：甲醛、乙醇、氯仿等。 4．某些固定剂可起到媒染作用：重铬酸等。 固定具体方法： 1．小块固定法 1×1 × 0.3cm（不超过0.5cm厚）。 2．整体固定法 （小动物——灌流法），效果好。 固定液能迅速渗透到各器官、组织。 具有一定硬度，有利于薄切。 可避免因取材时间过久—保持新鲜状态。 3．蒸汽固定法 用于涂片、印片等（骨髓涂片、淋巴印片）。 ? ? 装饰陨京悦纱就努炎扔脯寨痉韦鸿矣室甫娜址机耸锭伺坏槽秃格感催世询1.组织学技术1.组织学技术 ? 固定液：应具有以下性能 1. 对蛋白质、脂肪、类脂体、碳水化合物等具有沉淀、凝固作用。 2. 具有一定穿透力—迅速进入组织。 3. 对组织不引起收缩或膨胀。 4. 对组织产生一定的硬化作用。 5. 具有一定pH值。 6. 对染色无副作用。 ? 末蓬及热膳汗列准拍亭潭衅济瑶蓟弃囱咋朋淀擒卓胞冷撵醇庆禄画聂