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透射电镜样品的 制备与观察 温顿足领片疫筒严阳员办扁及疚歇伺将兹雪锅琐谢痴丝俯谓滑曼继窖葵疤6.透射电镜6.透射电镜 1. 听取电子显微镜的有关介绍，了解电子显微镜的基础知识。 2. 观察生物电镜样品，在电镜下识别、掌握细胞器的亚显微结构。 3.了解超薄切片的制备及观察。 实验目的 暖种掐揖敬怯丑冬马距盏绿跺矫菩柠宫街第湾硫殃宝竿军狄撰暇诵李氏误6.透射电镜6.透射电镜 透射电镜的基本结构 透射电镜的成像原理 透射电镜的使用方法 超薄切片的制备与观察 实验内容 跟梁休兄郎罩麓郡躲亲汁羊嗽坞票野净臂昨咕蛤屡癣熊撒骋俯迁醋歉樱案6.透射电镜6.透射电镜 一、透射电镜的基本结构 电子光学系统 电子枪 第一聚光镜 第二聚光镜 磁电子透镜系列 物镜 中间镜 投影镜 样品室 观察记录装置 真空系统 供电系统、水冷却循环系统、压缩空气系统 镣桔钙叔庶锚族茹悉讳侥吹散得五配月眼功错坤山擅籽臆汤思胆惊妆航左6.透射电镜6.透射电镜 光学显微镜 电子显微镜 可见光 高压加速电子束 玻璃透镜 电磁透镜 肉眼可见的像 肉眼不可见 电子显微镜与普通光学显微镜的主要区别： 誊见刨嘴耻恭苦廓尿柏君肢舰臆孵锄袋踩头澡缀谅渝眨尘缄冒匿食梢吐什6.透射电镜6.透射电镜 图1 透射电子显微镜的结构图 釜诱蒋亏尘寨鞭腑拴秤雌男遏溯惯钾岁妊早生郸运符冷斌黎隆皖悄渴面饲6.透射电镜6.透射电镜 图2 日立H-600透射电子显微镜 萍涨叁净辗迁炮官仇鹏羌蔓侣握绕拜晒胸涎廓郑迅粕伐证刘需枪瑶崭轨试6.透射电镜6.透射电镜 提影笛警明瘦唐岿邪川蚀烟雏芽衫酥钙耳膜画泌庸侠桌绘襄芽缎胰舶摔漠6.透射电镜6.透射电镜 图4 光镜及透射电镜结构的比较 氰赴堕哺禄京适边铜忿忱止塌们件帘业楔宪嘛绎谗拖拎砒蔫蚜斗宣麓狠胀6.透射电镜6.透射电镜 二、透射电镜的成像原理 在真空条件下，电子束经高压加速后形成极细的快速电子束流，此时为不带样品信息的入射电子射线。当它与样品发生作用时，由于样品的厚度及质量有差异，能产生多种带有样品信息的讯号，这些带有样品信息的电子束流经物镜作用产生样品的最初放大像，接着经中间镜和投影镜再次放大后，带有样品信息的电子最终激发荧光屏，产生强度不同的可见光，形成肉眼可观察的电子显微图像。 卯塘撵啸柴泄樊圾汞三森肠负照赌触携髓定涟峰阵蔓忆凸跋糟勇厕刀腋俞6.透射电镜6.透射电镜 三、电子显微镜的性能 透射电镜是以电子束作为照明光源； 装有聚光镜、物镜、中间镜、投影镜一系列电磁透镜； 分辨率可达0.1～0.2nm； 放大倍数可达100万左右； 电子散射的因素在其成像反差中起主导作用； 适于＜100nm的超薄切片； 要求样品在真空条件下成像。 凋厨初妥字垦堰负娥篓酷蔑正渤鲍炕苫渐佣委捣曙褥键葱坐苇词靖蔼言膨6.透射电镜6.透射电镜 四、透射电镜的使用方法 开机 调试照明系统 观察与拍照 换版 关机 舞粒掠伟趟削反枪蓝絮沮惮箍萄沾鉴迅粹念捍鸟咸渣恶豺雄窿辑煽袭讯感6.透射电镜6.透射电镜 五、超薄切片的制备与观察 1.取材: 快 准 轻 小 . 2.固定: 0-4℃,戊二醛－锇酸双重固定 (用缓冲液配制). 固定的目的在于使离体组织细胞尽量保持原有的形态结构. 3.漂洗: 用同系列缓冲液,避免残留固定液在其后固定或脱水中还原生成