分光光度计使用原理及应用.pdf

2014年 2月 (上旬刊)I设计与应用 分光光度计使用原理及应用 夏玉梅 国电东北环保产业集团有限公司沈水湾污水处理厂 摘要：分光光度计在实验室中作用甚天，在各个领域中都得到了良好的应用。本文对分光光度计的工作原理做了简要分析。 关键词 ：分光光度计 原理 应用 一 、 吸收光谱原理 宽度 内调节 ．由于棱镜色散力随波长不同而变化 ．较先进的分光 物质 中分子内部的运动可分为电子的运动 、分子 内原子 的 光度计 的狭缝宽度可随波长一起调节 振动和分子 自身的转动 ，因此具有 电子能级、振动能级和转动能 4、比色环 级 当分子被光照射时 ．将 吸收能量 引起 能级跃迁 ．即从基态 能 比色环也叫样品池 ．吸收器或比色皿 ．用来盛溶液 ．各个杯子 级跃迁到激发态能级 而i种能级跃迁所需能量是不 同的．需用 壁厚度等规格应尽可能完全相等 ．否则将产生测定误差 玻璃 比 不 同波长 的电磁波去激发 电子能级跃迁所需的能量较大 ．一般 色杯只适用于可见光区，在紫外区测定时要用石英 比色杯。不能 在 1eV～20ev．吸收光谱主要处于紫外及可见光区 这种光谱称 用手指拿 比色杯的光学面 ．用后要及时洗涤 ．可用温水或稀盐酸 ． 为紫外及可见光谱 如果用红外线f能量为 1ev 0．025eV)照射分 乙醇 以至铬酸洗液f浓酸 中浸泡不要超过 15分钟1．表面只能用 子 ．此能量不足以引起 电子能级的跃迁 ．而只能引发振动能级和 柔软 的绒布或拭镜头纸擦净 转动能级的跃迁 ．得到的光谱为红外光谱 。若以能量更低 的远红 5、检测器系统 外线 0．025eV～0．oo3ev照射分子．只能引起转动能级的跃迁 ．这 有许多金属能在光 的照射下产生 电流。光愈强 电流愈大 ．此 种光谱称为远红外光谱 由于物质结构不同对上述各能级跃迁 即光 电效应 因光照射而产生的电流叫做光电流 受光器有两 所需能量都不一样 ．因此对光的吸收也就不一样 ．各种物质都有 种 ．一是光电池 ．二是光电管。光 电池的组成种类繁多 ，最常见的 各 自的吸收光带．因而就可 以对不 同物质进行鉴定分析 ．这是光 是硒光 电池 光电池受光照射产生的电流颇大 ．可直接用微 电流 度法进行定性分析 的基础 。根据 朗伯一比耳定律 ：当入射光波长、 计量 出 但是 ．当连续照射一段时间会产生疲劳现象而使光 电流 溶质 、溶剂 以及溶液 的温度一定时 ．溶液的光密度和溶液层厚度 下降．要在暗中放置一些时候才能恢复。因此使用时不宜长期照 及溶液 的浓度成正 比．若液层的厚度一定 ．则溶液 的光密度只与 射 ．随用随关 ．以防止光电池 因疲劳而产生误差。光电管装有一 溶液 的浓度有关 ．吸光度与被测物质 的浓度成正 比，这就是光度 个 阴极和一个 阳极 ．阴极是用对光敏感 的金属f多为碱土金属的 法定量分析 的依据 氧化物1做成 ．当光射到阴极且达到一定能量时，金属原子 中电子 二 分光光度计的构造原理 发射 出来 。光愈强．光波的振幅愈大．电子放 出愈多。电子是带负 将一束复合光通过分光系统 ．将其分成一系列波长的单色 电的．被吸引到 阳极上而产生 电流。光 电管产生 电流很小 ，需要 光 ．任意选取某一波长 的光 ．根据被测物质对光 的吸收强弱进行 放大 分光光度计中常用 电子倍增光电管．在光照射下所产生的 物质的测定分析 ．这种方法称为分光光度法 ．分光光度法所使用 电流比其他光 电管要大得多．这就提高了测定的灵敏度。 的仪器称为分光光度计 各种型号的分光光度计 的基本结构都 检测器产生 的光电流以某种方式转变成模拟的或数字的结 相同，由如下五部分组成：①光源f钨灯、卤钨灯、氢弧灯、氘灯、汞 果，模拟输出装置包括 电流表 、电压表 、记录器、示波器及与计算机 灯、氙灯、激光光源)；②单色器f滤光片、棱镜、光栅、全息栅)；③样 联用等 ．数字