肿瘤学专业优秀论文 γ-氨基丁酸对结肠癌细胞生长的影响及其机制的研究.docVIP

肿瘤学专业优秀论文 γ-氨基丁酸对结肠癌细胞生长的影响及其机制的研究 关键词：结肠癌 γ-氨基丁酸 细胞生长 细胞凋亡 摘要：目的:观察γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)对结肠癌细胞株SW1116增殖的调节作用；GABA对细胞凋亡、细胞内凋亡相关蛋白bax的表达以及对细胞内信号传导第二信使环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate，cAMP)浓度和胞内游离Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;浓度([Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;]i)的影响，以探讨GABA的部分抗癌机制，及其受体后信号传导途径。 方法:采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比色法观察GABA对结肠癌细胞SW1116增殖的抑制作用；流式细胞术(flow cytometry，FCM)分析GABA对细胞凋亡率、以及细胞内凋亡相关蛋白bax表达情况的影响；放射免疫法检测GABA作用前后细胞上清中cAMP水平的变化；应用Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;荧光指示剂Fura-2负荷技术检测GABA对SW1116细胞[Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;]i的影响。 结果: 1．MTT比色法显示不同浓度的GABA(10amp;lt;amp;#39;-9amp;gt;mol/L～10amp;lt;amp;#39;-5amp;gt;mol/L)能够抑制SW1116细胞的增殖，呈剂量依赖关系(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 2．FCM分析结果显示GABA作用于SW1116细胞后，其细胞凋亡率明显高于对照组(Pamp;lt;0.01)，并可上调细胞内凋亡相关蛋白bax的表达，与对照组相比，差异有显著性意义(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 3．放射免疫法发现，GABA能显著地促进SW1116细胞内cAMP的生成，呈剂量依赖关系(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 4．Fura-2荧光负荷法显示GABA使细胞内[Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;]i明显升高，呈剂量依赖关系(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 5．GABA的上述作用均可被GABAamp;lt;,Bamp;gt;受体拮抗剂(CGP35348)所阻断，且其拮抗作用呈剂量依赖性(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 结论: GABA能抑制结肠癌SW1116细胞的生长，这种抑制作用可被GABAamp;lt;,Bamp;gt;受体拮抗剂所阻断。推测其机制可能与GABA通过GABAamp;lt;,Bamp;gt;受体介导上调细胞内凋亡相关蛋白bax的表达，促进细胞凋亡有关，其受体后信号传导可能是通过腺苷环化酶途径，同时Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;也参与了信号传导过程。 正文内容 目的:观察γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)对结肠癌细胞株SW1116增殖的调节作用；GABA对细胞凋亡、细胞内凋亡相关蛋白bax的表达以及对细胞内信号传导第二信使环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate，cAMP)浓度和胞内游离Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;浓度([Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;]i)的影响，以探讨GABA的部分抗癌机制，及其受体后信号传导途径。 方法:采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比色法观察GABA对结肠癌细胞SW1116增殖的抑制作用；流式细胞术(flow cytometry，FCM)分析GABA对细胞凋亡率、以及细胞内凋亡相关蛋白bax表达情况的影响；放射免疫法检测GABA作用前后细胞上清中cAMP水平的变化；应用Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;荧光指示剂Fura-2负荷技术检测GABA对SW1116细胞[Caamp;lt;amp;#39;2+amp;gt;]i的影响。 结果: 1．MTT比色法显示不同浓度的GABA(10amp;lt;amp;#39;-9amp;gt;mol/L～10amp;lt;amp;#39;-5amp;gt;mol/L)能够抑制SW1116细胞的增殖，呈剂量依赖关系(Pamp;lt;0.05或Pamp;lt;0.01)。 2．FCM分析结果显示GABA作用于SW1116细胞后，其细胞凋亡率明显高于对照组(Pamp;lt;0.01)，并可上调细胞内