朱砂叶螨谷氨酸门控氯离子通道GluCl1基因的克隆与序列特征分析.PDFVIP

农学学报 2013,3(06):20-26 Journal of Agriculture 朱砂叶螨谷氨酸门控氯离子通道GluCl1 基因的克隆与序列特征分析 1 1 1 1,2 1,2 云彩虹 ，陈 青 ，卜春亚，王有年 ，师光禄 1 （北京农学院生物科学与工程学院，北京102206； 2 农业部都市农业(北方)重点开放实验室/北京农学院，北京102206) 摘 要：朱砂叶螨是一种分布广泛、危害极大、难以防治和易产生抗性的农业害螨。为了研究朱砂叶螨杀 螨剂神经靶标谷氨酸门控氯离子通道，进一步确定阿维菌素对朱砂叶螨的抗性机理，采用同源基因克隆 以及RACE 技术，克隆朱砂叶螨杀螨剂靶标谷氨酸门控氯离子通道(GluCl 1)基因全长，分析其序列特 征。结果表明，GluCl 1基因序列全长为1856 bp ，其中开放阅读框(ORF)为1338 bp ，编码455 个氨基酸，N 端含25 个氨基酸的信号肽，有4 个跨膜结构域，GenBank 登陆号为KC543353。同源比对分析表明，朱砂 叶螨与其他蜱螨目GluCl 基因有高度的同源性，特别与二斑叶螨的相似度最高。研究还发现朱砂叶螨 敏感品系GluCl 1 第3 个跨膜区的G314 ，与二斑叶螨敏感品系相应位点的氨基酸G323 一致，而二斑叶螨 抗性品系相应位点突变为D323。本研究进一步证实了G323 突变为D323 和二斑叶螨对阿维菌素产生 抗性有关。本研究为今后建立以朱砂叶螨谷氨酸门控氯离子通道为靶点的选择性杀螨剂体外筛选体系 奠定坚实基础。 关键词：朱砂叶螨；基因克隆；谷氨酸门控氯离子通道 中图分类号：S433.7 文献标志码：A 论文编号：2013-0167 Cloning and Characterization of Full-length Glutamate-gated Chloride Channel Gene from Tetranychus cinnabarinus 1 1 1 1,2 1,2 YunCaihong,ChenQing,BuChunya,WangYounian ,ShiGuanglu (College of Biological Science and Engineering, Beijing University of Agriculture,Beijing102206,China;1 2Key Laboratory of Urban Agriculture (North) of Ministry of Agriculture P. R. China/ Beijing University of Agriculture,Beijing102206,China) Abstract:Theaimofthisstudyistocloneinsecticidetargetglutamate-gatedchloridechannel(GluCl1)gene from Tetranychus cinnabarinus andanalyzeitssequencecharacter,usingatargeteddegeneratePCRand RACEstrat