免疫检测的质量控制.pptVIP

第二十一章临床免疫检验的质量保证 案 例 患者王某因双下肢股骨粉碎性骨折，到 某县医院就诊。经过医院会诊讨论后认为患者损伤严重，不易采取保守治疗，拟采用手术治疗，并嘱咐该患者的主治医生黄某作好手术前的一切检查和术前准备。经 检查，患者各项指标均符合手术要求，但只有一项不大引人注意的简单实验，出血时间（BT）异常，为6分30秒。正常参考值（DUKE法）为1~4分，随然 这一实验最近已被宣布停止使用，但在当时的许多医院都将其作为手术前必查的一项筛选指标。 黄某自信这个指标不会对手术产生影响，但为了能够为再次术前讨论 中能够通过，他擅自将出血时间改为3分30秒，结果手术方案被通过。随后黄某作为主治医生在硬膜外麻醉条件下为王某实施双下肢股骨粉碎性骨折切复内固定 术。手术过程中王某出血过多，各种止血措施效果不佳，最后出现失血性休克，经抢救无效死亡。患者家属为此进行了医疗事故鉴定和举报，该市医疗事故鉴定委员 会鉴定结论为一级医疗责任事故。 从1949年美国College of American Pathologists（简称CAP）首先开始研究临床实验室室内质量控制（简称质控）问题，美国学者Levery和Jenning于1950年发表第一篇关于使用质控图的实验室室内质控，临床检验实验室的室内质控工作正式拉序幕。 到70年代，实验室质量控制进入一个新的阶段--全面质量管理，推行Good Laboratory Parctice（简称GLP）。进入80年代末期，GLP的统一标准产生了，发展到认证实验室管理阶段。 　　卫生部临床检验中心免疫质控室从1988年开始在全国范围内开展乙肝标志物检验的质量评价活动，一直采用这一套质量评价方法，并在实践中不断实践、提高和完善，希望能找出一条适合中国国情的，行之有效的质量管理的道路。 室间质量评价 （External Quality Assessment, EQA） 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果 准确度 (accuracy) :待测物的测定值与其真值的一致性程度。 偏倚 (bias) 待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。 精密度(precision) 在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。 重复性条件(repeatability conditions) 是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。 批 (Run) 在相同条件下所获得的一组测定。 均值（Mean） P270 标准差（Standard deviation, SD) 变异系数（Coefficient of variation, CV） 正态分布(Gaussian distribution) 当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，得到一个两头低，中间高，中为所有测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，又称高斯分布。 正态分布的基本统计学含义可用均数、标准差（s）和概率来说明。 诊断敏感性（sensitivity of diagnosis） 是指将实际患病者正确地判断为阳性（真阳性）的百分率。 诊断特异性（specificity of diagnosis） 是指将实际无病者正确地判断为阴性（真阴性）的百分率。 诊断效率（efficiency of diagnosis） 是指能准确区分患者和非患者的能力。 阳性预测值（（positive predictive value, PPV） 是指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率。 阴性预示值(negative predictive value, NPV) 是指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的比率。 标本类型及采集容器 标本采集时间及患者准备 内源性干扰因素 外源性干扰因素 最常用的标本：血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液 。 建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。采集容器最好为一次性无菌密闭容器。 标本采集时间及患者准备 激素和治疗药物 感染性病原体抗原、抗体 肿瘤标志物 特定蛋白 类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物小分子、总蛋白浓度等 补体干扰的排除 56℃ 30min加热可使标本中补体C1q灭活 使用特异的鸡抗体IgY作为标记或固相抗体 异嗜性抗体干扰的排除 使用特异的兔F(ab’)2片段作为固相或标记抗体。 在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig，封闭可能存在的异嗜性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。 使用靶特异的非Ig亲和蛋白（Affibody）替代固相或标