密码子优化型HPV16L1基因在两种昆虫细胞中的表达-生物通.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（７）：２７～３２ 密码子优化型ＨＰＶ１６Ｌ１基因在 两种昆虫细胞中的表达 １ ２ ２ ２ １ 龚业莉 　王　琳 　耿建玲 　刘　颖 　夏焕章 （１沈阳药科大学生命科学与生物制药学院　沈阳　１１００１６　２沈阳三生制药有限责任公司　沈阳　１１００２７） 摘要　目的：提高１６型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ１６）Ｌ１基因在杆状病毒昆虫细胞中的表达水平，为研 制预防性ＨＰＶ疫苗奠定基础。方法：根据昆虫细胞密码子偏性对野生型 ＨＰＶ１６Ｌ１基因进行改 造，利用Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ表达系统获得重组杆状病毒，感染昆虫细胞Ｓｆ９和ＨｉｇｈＦｉｖｅ。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 鉴定表达产物；电镜下观察病毒样颗粒形成。利用ＥＬＩＳＡ法评价 ＨＰＶ１６Ｌ１基因的优化效果，探 讨Ｌ１蛋白表达的最佳条件。结果：在相对分子质量５６ｋＤａ处出现ＨＰＶ１６Ｌ１的特异性条带；电镜 下可见病毒样颗粒在昆虫细胞的核内形成；优化型ＨＰＶ１６Ｌ１基因的表达水平显著高于野生型。