实验大屎腕肝S的制备.pptVIP

实验六 大鼠肝S9的制备和蛋白含量测定 器材和试剂 器材：低温高速离心机、洁净工作台、匀浆器、注射器、手术剪、低温冰箱、液氮罐等 试剂： 1.17% （0.15M） KCl Tris-HCl缓冲液：6.05g Tris加约80ml蒸馏水溶解，用HCl溶液调pH值至7.4，最后用蒸馏水定容至1000ml 操作步骤 实验动物 大鼠：健康 雄性 成年 SD 或 Wistar 5~6 周 龄 150g左右 1. 苯巴比妥钠 80mg/kg， 腹腔注射，连 续3～5d，最后一次给药后24h后采样。主要诱导P450 2. 戊巴比妥钠 80mg/kg，腹腔注射，连 续3d，第4d采样。主要诱导P450 3.多氯联苯（Aro-clor1254或国产PCB-五氯） 溶剂 玉米油 浓度 200mg/mL 剂量 500mg/kg 方式 腹腔注射 时间 3d 采样 第4d 同时诱导P450和P448 4.β-萘黄酮 玉米油， 80mg/kg，腹腔注射连续3d，第4d采样。主要诱导P448 采样前禁食24h，但可以自由饮水； 断头处死，用75%酒精消毒动物皮部，剖开腹部； 无菌取出肝脏，置平皿中称重，用预冷的0.15M KCl溶液淋洗数次，以便除去能抑制微粒